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人膀胱平滑肌细胞

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      上海烜雅生物科技有限公司

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    • 英文名

      Human Bladder : Normal Bladder Smooth Muscle Cells

    • 运输方式

      常温运输/干冰运输

    人膀胱平滑肌细胞简介:
    人膀胱平滑肌细胞分离自正常人膀胱平滑肌组织。膀胱是由平滑肌细胞组成的中空器官。膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导CO2合酶的表达与多种病理状况有关,包括膀胱功能障碍。研究表明,组织缺氧抑制人类膀胱平滑肌细胞的增殖,膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径,因此,了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化,这是治疗方法取得进展的重要一步。烜雅生物科技提供的人膀胱平滑肌细胞均来自新鲜组织,用于培养人膀胱平滑肌细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人膀胱平滑肌细胞培养试剂盒(Human Bladder PrimaCell™: Normal Bladder Smooth Muscle Cells  Cat No. 3-0309)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下,人膀胱平滑肌细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

    人膀胱平滑肌细胞使用方法:
    1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
    取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

    2、细胞传代:
    待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
    方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    3、细胞冻存:
    1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
    2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
    3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 

    4、细胞复苏:
    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
    2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
    3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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    • 膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定

      一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞

    • 膀胱(urinary bladder)

         贮存尿液的囊性器官,其大小、形状、位置和膀胱壁的厚度均随尿液充盈程度而异。成人正常容量为 300~ 500毫升,最大容量可达 800毫升。空虚的膀胱位于小骨盆内,呈三棱锥体形,前上部称膀胱顶,后下部呈三角形称膀胱底,顶、底之间为膀胱体。当膀胱充盈时呈卵圆形,可超出小骨盆腔与腹前壁接触,触诊时可在腹下部摸到。膀胱壁由粘膜、粘膜下层、肌层和外膜组成。粘膜被覆于膀胱内面,除膀胱三角区外,经粘膜下层与肌层疏松连接。膀胱收缩时,粘膜聚集成皱襞,膀胱充盈时皱襞消失。在膀胱底部,左、右

    • 膀胱平滑肌细胞原代培养

      1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D-hanks液漂洗1次5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔,则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状,撕去粘膜层后,助手以一眼

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