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详见说明书
- 细胞类型:
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- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
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21
- 英文名:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型:
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病:
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- 组织来源:
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- 规格:
详见说明书
细胞描述
人膀胱平滑肌细胞产品描述:人膀胱平滑肌细胞分离自正常人膀胱平滑肌组织。膀胱是由平滑肌细胞组成的中空器官。膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导合酶的表达与多种病理状况有关,包括膀胱功能障碍。研究表明,组织缺氧抑制人类膀胱平滑肌细胞的增殖,膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径,因此,了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化,这是治疗方法取得进展的重要一步。公司提供的人膀胱平滑肌细胞均来自新鲜组织,用于培养人膀胱平滑肌细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人膀胱平滑肌细胞培养试剂盒(HumanBladderPrimaCell:NormalBladderSmoothMuscleCellsCatNo.3-0309)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,人膀胱平滑肌细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞传代:
人膀胱平滑肌细胞1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成“神经球”生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1. 人膀胱平滑肌细胞 取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm,5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x。
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丙硫异烟胺(标准品)Prothionamide质量规格:>98%,标准品
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汽巴蓝质量规格:ACS GradeCibacron blue 3G-A
DEAE葡聚糖质量规格:BRDEAE Dextran
氟啶酮(>98%,植物激素级)质量规格:>98%,植物激素级Fluridone
组胺(>98%,BC)质量规格:>98%,BCHistamine
人膀胱平滑肌细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 到 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
贮存尿液的囊性器官,其大小、形状、位置和膀胱壁的厚度均随尿液充盈程度而异。成人正常容量为 300~ 500毫升,最大容量可达 800毫升。空虚的膀胱位于小骨盆内,呈三棱锥体形,前上部称膀胱顶,后下部呈三角形称膀胱底,顶、底之间为膀胱体。当膀胱充盈时呈卵圆形,可超出小骨盆腔与腹前壁接触,触诊时可在腹下部摸到。膀胱壁由粘膜、粘膜下层、肌层和外膜组成。粘膜被覆于膀胱内面,除膀胱三角区外,经粘膜下层与肌层疏松连接。膀胱收缩时,粘膜聚集成皱襞,膀胱充盈时皱襞消失。在膀胱底部,左、右
1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D-hanks液漂洗1次5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔,则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状,撕去粘膜层后,助手以一眼
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