TOP10F`化学感受态细胞北京供应商

特别提示：包括TOP10F`化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TOP10F`化学感受态细胞
英文名称：TOP10F′Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0003
产品规格：10×100μl/50×100μl

TOP10F`菌株来源于TOP10菌株。
将F`{lacIq Tn10(TetR)}因子转入TOP10菌株，即为TOP10F`。
该F`因子携带lacIq 抑制子，可抑制trc，tac，lac等启动子下游基因的表达，从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。
recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
TOP10F可用于构建克隆，蓝白斑筛选(如用于蓝白斑筛选，需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达)实验，具有四环素抗性。
TOP10F`感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>107cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F´{lacIq Tn10(TetR)} mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1araD139 ∆(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
操作说明：
1.TOP10F`感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰中静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱 12-16h，时间过长会产生假阳性小菌落。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

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