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MRC-5人胚肺成纤维细胞

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  • ¥600 - 2000
  • xuanya
  • XY-JDXB-1049
  • 国产/进口
  • 2025年10月15日
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      26

    • 细胞形态

      成纤维细胞样

    • 运输方式

      常温运输/干冰运输

    • 生长状态

      贴壁

    • 英文名

      MRC-5

    MRC-5人胚肺成纤维细胞简介:
    中文名称:人胚肺成纤维细胞
    简称:MRC-5
    细胞培养条件:DMEM+10% FBS
    生长特性:□ 贴壁   □悬浮   □半悬浮半贴壁
    形态:成纤维细胞样
    来源:ATCC
    是否通过STR鉴定:□是
    背景资料:MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。 它是正常二倍体细胞系,46,XY核型。 模式染色体数为46,概率为70%。

    MRC-5人胚肺成纤维细胞使用方法:
    1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
    取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

    2、细胞传代:
    待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
    方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    3、细胞冻存:
    1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
    2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
    3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 

    4、细胞复苏:
    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
    2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
    3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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      实验材料: 1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液; 4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml; 5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油; 6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;

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