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LX-2 人肝星状细胞
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这些永生化的人肝细胞构成了药物毒理学研究的体外模型,并用于研究人肝细胞癌的病因和发病机理。
里边反THLE-2(ATCC CRL-10149和THLE-3细胞系购自原代正常肝细胞感染衍生自具有SV40大T抗原。通过将含有逆转录病毒载体[RF84749]产生的病毒将SV40T抗原的Bgl I-Hpa I片段加入到兼嗜性包装细胞系PA317中。
不,裸鼠
[RF84750] THLE-2和THLE-3细胞表达正常成人肝上皮细胞的表型特征。当注射到无胸腺裸鼠中时,它们是非致瘤性的,具有近二倍体核型,并且不表达甲胎蛋白。[RF84750] THLE-2和THLE-3细胞将苯并[a]芘为其最终的致癌代谢物,其加合DNA,这表明功能性细胞色素P450途径。[RF84750] THLE细胞也保留了其他参与化学致癌物质代谢的酶,如环氧化物水解酶,NADPH细胞色素P450还原酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,谷胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶。
[RF84750]发现1989年5月提交给ATCC的培养物被支原体污染。通过用BM Cycline进行21天治疗来治愈子代。在处理后6周时间后,通过Hoechst染色,PCR和标准培养试验测定细胞的支原体。所有测试均为阴性。固化的细胞系可以ATCC CRL-2706获得。
注意:使用的烧瓶应预先涂上 0.01 mg / mL纤连蛋白,0.03 mg / mL I型牛胶原蛋白和溶于BEBM培养基中的0.01 mg / mL牛血清白蛋白的混合物。
注意:为了避免结块,在等待细胞分离时,不要通过敲击或摇动烧瓶来搅动细胞。难以分离的细胞可置于37℃以促进分散。
中等更新:每周两到三次。
注意:有关细胞系的酶解和传代培养的更多信息,请参阅动物细胞培养中的第10章, R.Ian Freshney撰写的基本技术手册,第3版,由Alan R.Liss,NY,1994出版。
冷冻培养基:补充有5%(v / v)DMSO的完全生长培养基
储存温度:液氮气相
气氛:空气,95%; 二氧化碳(CO 2),5%
温度: 37°C
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