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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
81
- 英文名:
DNA Nested Deletion Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
10次
特别提示:包括DNA嵌套缺失试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA嵌套缺失试剂盒
英文名称:DNA Nested Deletion Kit
产品货号:BTN100213
产品规格:10次
本产品是在Henikoff方法的基础上改良而得。zuì常见的DNA嵌套缺失方法是利用ExoⅢ等外切酶从线状DNA的一端连续切除核酸,zuì后环化得到可以转化的质粒。该方法zuì早由Henikoff在Putney的方法的基础上发明,其流程图如下:
产品特点:
1.不需要使用超螺旋的质粒和任何限制性内切酶,非常皮实。
2.一站式,用户只需要提供质粒,不需要单独准备其他试剂。
3.一管式,不需要任何纯化和回收的处理。
4.提供阳性对照质粒,便于在遇到困难时分析原因。
5.得到的片段可以用于侧序和蛋白结合位点的分析等试验。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| DNA聚合Buffer | 1mL |
| DNA酶切Buffer | 1mL |
| 酶切终止Buffer | 1mL |
| DNA连接Buffer | 1mL |
| T4 DNA聚合酶 | 10μL |
| T4 DNA Ligase | 10μL |
| Exo Ⅲ | 10μL |
| S1核酸酶 | 10μL |
| 对照模板质粒 | 10μg |
| 超纯水 | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用效果:
将5μg变性的质粒DNA与特异的引物混合,用T4 DNA聚合酶进行全长合成,然后用ExoⅢ酶切,在不同时间点取样,得到单向酶切产物,然后用绿豆核酸酶去掉单链DNA,zuì后用DNA连接酶将DNA自身环化,zuì后转化细菌。
图注:用本产品处理含有2.5 KB插入片段的质粒,两边为1Kb DNA marker。中间6条带从左到右分别为ExoⅢ处理0、1、2、3、4和5分钟的DNA(S1核酸酶处理后才上样电泳)
我公司销售的DNA嵌套缺失试剂盒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验(MMLV)反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温(60℃ -70℃)有效地逆转录mRNA,从而消除了5'端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响;改进之四是采用热启动PCR (hot start PCR)技术和降落PCR(touch down PCR)提高PCR反应的特异性。 随着RACE技术日益完善,目前己有商业化RACE技术产品推出,如CLONTECH的MarathoTM技术和SMARTTM RACE技术。邢桂春等(2001)先后使用上述两种试剂盒进行RACE反应,结果发现使用
中抽提获得。试剂:PCR 试剂盒购自上海生工生物工程公司。引物:扩增人CD137 胞膜外区的引物P1 :5’CCC AAG CTT ATG GGA AAC AGC TGT TAC 3’, P2 :5’AAA CTG CAG CTG CGG AGA GTG TCC TG 3’;扩增hIgG1Fc 的引物P3 : 5’AAA CTG CAG TCT TGT GAC AAA ACT CAC 3’, P4 : 5’CCC GAA TTC TCA TTT ACC CGG AGA CAG 3’,扩增 HBV DNA
【求助】免疫组化, FISH, CGH, LOH, MSI, 克隆性重排等的应用范围及应用”盲点”
相关基因及遗传综合征等领域。 盲点: CGH技术所能检测到的最小的DNA扩增或丢失是在3-5Mb,故对于低水平的DNA扩增和小片段的丢失会漏检。此外在相差染色体的拷贝数量无变化时,CGH技术不能检测出平等染色体的易位(就是姐妹染色单体同源序列的互换)。图像分析系统昂贵。其对检测原癌基因扩增较为灵敏,但对检测基因缺失敏感性则相对较弱。 C LOH 杂合性缺失:一个位点上两个多态性的等位基因中的一个出现缺失。杂合性缺失在肿瘤细胞中是一种非常常见的DNA变异。抑癌基因的杂合
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