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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
475
- 英文名:
Probe One-Step qRT-PCR UltraMix
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100次
特别提示:包括一步法RT-qPCR试剂盒(荧光探针)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法RT-qPCR试剂盒(荧光探针)
英文名称:Probe One-Step qRT-PCR UltraMix
产品货号:JN0053
产品规格:100次
本试剂盒向PCR体系中添加了荧光探针(TaqMan或Molecular Beacon等),在扩增过程中,荧光量与扩增产物量成正比,因此可通过荧光量来测定样品核酸量。本制品以RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后再以合成的cDNA为模板,继续用基因特异性引物扩增,并用荧光探针进行检测。在同一反应体系中可完成从反转录到qPCR的全部过程。
本制品采用的酶是HotStart Taq,并结合了特别的缓冲液体系,能有效抑制非特异性反应,在更广的范围内对核酸含量进行准确定量。
试剂盒组分:
| 组份 | 体积 |
| 2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix | 1ml支 |
| BalbScript RT Enzyme Mix | 100μl |
| RNase Free Water | 1ml×2支 |
| ROX Reference Dye I | 200μl |
| ROX Reference Dye II | 200μl |
产品特点:
高特异性:采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性。
高效:百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用试剂,具有更高扩增效率和灵敏度。
使用建议:
请将体系上下颠倒混匀,动作轻柔,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头及Microtube等,尽量避免污染。
·用ROX Reference Dye I校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus;其他仪器。
·用ROX Reference Dye II校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 7500/7500 Fast;Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P;其他仪器。
·不需要用ROX Reference Dye校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/ iQ /My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon /Chromo4;Eppendorf MasterCycler realplex/ realplex 2s。Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;R℃he Applied Science LightCycler 480;Thermo Scientific PikoReal Cycler;Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/ Rotor-Gene 6000;其他仪器。
常用反应体系(20μl):
| 加入物 | 加入量 |
| 2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix | 10μl |
| BalbScriptR RT Enzyme Mix | 1μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 探针 10uM | 0.4μl |
| 模板 | 1pg~1μg |
| RNase Free Water | 至20μl |
常用PCR循环:
| 两步法扩增程序(推荐): | |
| 42℃ | 30min |
| 94℃ | 5min |
| 35-40次循环 | 95℃,15s 60℃,1min |
| 三步法PCR扩增程序(引物Tm值较低或其他原因): | |
| 42℃ | 30min |
| 94℃ | 5min |
| 35-40次循环 | 95℃,15s 57℃,20s 72℃,30s |
储存条件:-20℃
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