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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
SCCP- Single Step Competent Cell Preparation Kit
- 供应商:
上海善然生物科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
250T
| 1)简单、快速,整个过程仅需5分钟,一步即可完成。 2)不需要热激。 3)能够长期稳定保存在-70℃,转化效率几乎不受影响。 4)转化效率高达106~108 pfu/µg DNA | ||||
| sccp-01 | SCCP- Single Step Competent Cell Preparation Kit | 一步法感受态制备液 | 250 | 270.00 |
| sccp-02 | SCCP- Single Step Competent Cell Preparation Kit | 一步法感受态制备液 | 500 | 500.00 |
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文献和实验TSS方法制备感受态细菌(又称一步法) 一、 准备工作 1、 缓冲液1×TSS的配制: 事先配制1M的氯化镁――20.3g氯化镁(6分子水结晶)/定容于100ml去离子水后封装,不用灭菌。 取干净的100ml 量筒和100ml 烧杯,用量筒量取100ml去离子水,加入至烧杯中,取 1 g 蛋白胨,0.5g 酵母抽提物,0.5g 氯化钠,10 g PEG(MW= 3350), 5ml DMSO,5ml 的1 M氯化镁,溶解后用盐酸或者氢氧化钠调整pH为6.5,混匀后用
培养时间控制在16小时左右为宜。绝对不宜超过18小时。 4. 再接种培养:根据需要制备的感受态细菌的量,按照1:100的比例用新鲜培养的过夜菌接种培养。例如取500微升的新鲜过夜菌到50毫升的LB中继续37℃约200rpm培养。通常在大约培养2-2.5小时后OD600可以达到0.3-0.5。 5. 制备感受态细菌:在培养的细菌OD600达到0.3-0.5时,4℃2000g离心5分钟收集细菌。如果离心沉淀前的菌量为50毫升,按后续操作进行,如果是其它体积则按比例换算后进行后续操作。用5毫升
The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
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