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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
84
- 英文名:
Inclusion body Purgation buffer
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷冻(-20℃)
- 规格:
10次
特别提示:包括包涵体洗涤液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:包涵体洗涤液
英文名称:Inclusion body Purgation buffer
产品货号:GS1429
产品规格:10次
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
细菌在进行重组表达的过程中,决大多数所表达的蛋白质以无定形,非水溶性的包涵体的形式存在,然而在包涵体中,真正的目的蛋白只占50%左右,此外还含有脂类、脂多糖、核酸和杂蛋白等其它成分,同时脂体及部分破碎的细胞膜及膜蛋白又与包涵体粘连在一起,而这些成分会影响包涵体蛋白的复性。故变性前应洗涤包涵体,以去除杂质含有RNA、DNA、脂多糖、脂蛋白等杂质,使得所得到的包涵体更加纯净,以方便于包涵体的溶解和复性等操作过程。本试剂采用还原剂、盐和蛋白变性剂,使包涵体溶解,从而释放蛋白质;内含作用强烈的蛋白酶抑制剂,从而保证了蛋白的完整性。适用于重组细菌中不溶性重组蛋白质-包涵体的变性提取,提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE或者在低温下的透析或稀释,以便尝试复性。
应用
该试剂盒可用于包涵体的溶解和复性等操作过程。
组份
溶液A,溶液B,固体C
我公司销售的包涵体洗涤液北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验条带说明,从左到右,或1234567..... 2、建议把流程中的各个部分所用缓冲液说明一下,例如: 破菌缓冲液:如pH8.0,20mMTris,0.5N NaCl 破菌方法:如超声,4s工作,4s间隙,冰水浴,共200次 包涵体洗涤液:如PBS(pH7.4,20mM PB,0.15N NaCl) 包涵体溶解液:如pH8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素 柱平衡液:如pH8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素,20mM 咪唑 柱淋洗液:如pH
全血,按照1:1比例加入1×稀释洗涤液,将血液进行稀释(以降低血液粘稠度),轻柔混匀,备用。 2) 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液,将稀释后的血样平铺到分离液液面上方(分离液:稀释全血=1:2),保持两液面界面清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 离心结束后,吸弃血浆层,小心吸取PBMC层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为稀释血浆层、PBMC层、分离液层和红细胞层(见图
纤维超滤柱 大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。 小规模研发时也有用做浓缩的,但感觉死体积比较大。 (5)高速冷冻离心机 小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf (6)磁力搅拌器 就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。推荐品牌:国产的都行,最好配4或6工位的。 (7)真空泵 离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌:Millipore WP61型。 (8)过滤
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