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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
207
- 英文名:
JM109 Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
20×100μl/100×100μl
特别提示:包括JM109化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:JM109化学感受态细胞
英文名称:JM109 Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0006
产品规格:20×100μl/100×100μl
JM109菌株来源于E.coli K strain,是提取高质量DNA的理想菌株,recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
携带hsdR17基因型背景,使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解。laqI qZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验;
JM109感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率可达1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17(rk-,mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F′traD36 proAB laqIqZΔM15]
操作说明:
1.JM109感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
我公司销售的JM109化学感受态细胞北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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原理: 转化(Transformation ):将外源DNA 分子引入受体细菌,使之获得新的遗传性状。受体细菌一般是限制修饰系统缺陷的变异株,不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-,M-),可以容忍外源DNA 分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法,如电击或CaCl2 、RbCl/KCl等化学试剂的处理后,细胞膜的通透性增高,成为感受态细胞(Compenent cells),使外源DNA 分子得以进入。目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2 和RbCl/KCl法,RbCl
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