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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
476
- 英文名:
Trypsin-EDTA Solution
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
长期保存放置于-20℃,
- 规格:
100ml
特别提示:包括胰蛋白酶-EDTA溶液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:胰蛋白酶-EDTA溶液
英文名称:Trypsin-EDTA Solution
产品货号:MT0103
产品规格:100ml
本制品含0.25%胰酶和0.02%EDTA。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的解离。本制品具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用方法:
1.贴壁细胞的消化:
① 吸去培养液,用无菌的PBS洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
② 加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
③ 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④ 如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
⑤ 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2.组织的消化:不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2.胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
保存条件:长期保存放置于-20℃,保存2年,一经融化后放置于4℃保存,可放置6个月,避免反复冻融。
我公司销售的胰蛋白酶-EDTA溶液北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验干净; 将组织置于平皿中,用眼科剪刀剪成小颗粒(1~2 mm3); 加入 30 倍组织量的蛋白酶溶液(0.1% 胰蛋白酶和 0.02%EDTA 等比混合); 移液管转至三角烧瓶,置于37℃水浴或者恒温箱中消化 20~60 min,每隔5~10 min震荡一次。若需消化较长时间,可每隔 15 min 将 2/3 的消化上清液转移到离心管中冰浴或离心去除消化液,加入含血清培养基终止消化,另补充新的消化液至三角烧瓶中继续消化; 将消化液或分批收集的细胞悬液经 200~300 目的滤网过滤,300 g
基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
消化后,MALDI技术分析得到的肽指纹图谱。使用1-D SDS PAGE胶分离后的目标蛋白分别使用:无戊二醛的银染法(图左)和Zn2+-imidazol染色法(图右)进行染色。切胶后用胰蛋白酶进行消化,使用多孔 R2磁珠进行浓缩,DE-MALDI-RETOF-MS分析,得到胰蛋白酶肌动蛋白肽的质量及其S/N(斜体)比率。 本文由百泰派克生物科技整理编辑。未经许可,不得转载。 北京百泰派克公司采用高分辨率质谱平台技术,包括Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap
。 1)高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0,工作液)或0.001M EDTA(pH8.0)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。 2)煮沸热修复 切片脱蜡至水后,放入盛有 0.01M 枸橼酸钠缓冲溶液(pH
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