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- 技术资料
- 保存条件:
-20度
- 保质期:
3-5年
- 英文名:
Trypsin/EDTA solution
- 库存:
大量
- 供应商:
中乔新舟
- CAS号:
00120303000
- 规格:
100ml
| 货号 | CSP090 |
| 名称 | 胰酶/EDTA消化液 |
| 描述 | 胰蛋白酶是一种在胰腺中产生的丝氨酸蛋白酶。***四乙酸(EDTA)是一种螯合剂,能分离Ca+2、Mg+2等金属离子,增强胰蛋白酶反应。0.5%胰蛋白酶/EDTA溶液(T/E)为无菌磷酸盐缓冲盐水溶液,室温下pH值为7.4。 |
| 成分 | 不含(-) • 酚红 |
| 外观 | 澄清液体 |
| 渗透压 | 270 ~ 320 mOsm/kg·H20 |
| pH 值 | 7.2 ~ 8.0 |
| 供应限制 | 仅供科研使用 |
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- 内容
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文献和实验易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清
-->门静脉插管-->D-Hanks'液灌注,同时剪开下腔静脉-->灌以胰酶消化液-->离体肝脏并剪碎-->继续消化-->以尼龙网过滤-->450 g X 5'(4度,下同)-->ppt以HBSS重悬-->混以Nycodenz液-->转至离心管,并覆以HBSS-->1450 g X 16'-->取界面细胞-->重悬、离心收集细胞-->细胞计数,并判断存活率和产量-->按照常规接种-->次日换液。传代方法:弃培液-->以D-Hanks'液洗两次-->0.125%胰酶(原代最好加0.05% EDTA)消化
/L),HBSS,台盼兰等。 方法 大鼠腹腔麻醉-->剖腹-->门静脉插管-->D-Hanks'液灌注,同时剪开下腔静脉-->灌以胰酶消化液-->离体肝脏并剪碎-->继续消化-->以尼龙网过滤-->450 g X 5'(4度,下同)-->ppt以HBSS重悬-->混以Nycodenz液-->转至离心管,并覆以HBSS-->1450 g X 16'-->取界面细胞-->重悬、离心收集细胞-->细胞计数,并判断存活率和产量-->按照常规接种-->次日换液。 传代











