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- XK-PCR-1725
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- 2025年11月19日
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- 技术资料
- 库存：
56
- 英文名：
Chicken derived ingredients Detection Kit (Real-Time PCR Method)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃±5℃，避光保存
- 规格：
48T
【产品名称】
通用名称：鸡源性成分(Chicken)核酸检测试剂盒(荧光-PCR 法)英文名称：Chicken derived ingredients Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】48T/盒
【预期用途】
动物源性成分广泛分布于食品、饲料、化妆品等，与人们的生活息息相关，其中食品和饲料所占的比例最大。肉及肉制品掺假成为世界各国共同关注的热点问题， 肉食品及其饲料的安全隐患直接关系到人类的安危。近几十年来，以 PCR 技术为核心的动物源性成分检测获得了广泛应用。本试剂盒适用于动物组织以及食品、饲料等样本中鸡源性成分的检测。
【检验原理】
本试剂盒对鸡源性成分基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3]，用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测，从而达到快速检测之目的。
【试剂组成】
| 名 称 | 规 格 |
| 酶液 | 50μL×1 管 |
| Chicken 反应液 | 1.0mL×1 管 |
| Chicken 阳性质控品 | 50μL ×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
注：
1.不同批号试剂不能混用。
2.试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次。有效期 12 个月。【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。【标本采集】
取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g。【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过 6 个月，标本运送应采用 0℃冰壶。
鸡源性成分(Chicken)核酸检测试剂盒(荧光-PCR 法)【使用方法】
1.1.样本前处理：
取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中， 8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。
1.2.
DNA 提取DNA 的提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2.试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | Chicken 反应液 | 酶液 |
| 用量 | 20μL | 1μL |
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21uL/管。
3.加样（样本处理区）
将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4.PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1.将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
4.2.设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25ul；荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3.推荐循环参数设置：
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
| 2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 是 |
5.结果分析判定
5.1.结果分析条件设定
6.检测方法的局限性
7.质控标准
鸡源性成分(Chicken)核酸检测试剂盒(荧光-PCR 法)注意事项
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Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
于上佳的上样缓冲液中，可产生相等或预期强度的条带，并且不含有条带污点，无染色阴影。与此相反，分子量标准 #1 采用较老技术制造，并存在于次优组分的缓冲液中。 b. 样品和标准品准备 须计算上样到凝胶中的 DNA 量，以确保目的条带良好分离，并用于可视化和检测。虽然用荧光染料足以检测 1 - 100 ng/条带的 DNA，但最小可检测量取决于 所用染料(了解更多: 核酸染色特性）[2]。注意，样品或标准品的超载会造成条带污点并遮盖附近条带，从而导致条带分辨不清，特别是片段大小相似时(图 2A)。 图
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