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- Thermo scientific -fermentas
- SM0191
- 2025年10月22日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 6X DNA Loading Dye | ||||
| SM0191 | 250 (5x50) µg (0.5 µg/µl) | 2 x 1.00 ml | SM0191 | |
| SM0192 | 250 (25x50) µg (0.5 µg/µl) | 10 x 1.00 ml | SM0192 | |
| SM0197 | 50 µg (0.5 µg/µl) | 2 x 1.00 ml |
- Features
-
- 大分子DNA大小鉴定和粗略定量。
- 条带窄。
- 配套提供样本DNA上样染料。
TE缓冲液保存的普通型分子量标准可以经T4 Polynucleotide Kinase (#EK0031)放射性标记。Klenow Fragment, exo- (#EP0421)或Klenow Fragment (#EP0051)也可通过末端补平方法放射性或非放射性标记该类分子量标准，见操作方法。
备注
- 具有粘性末端的条带(Lambda DNA的12 nt cos位点)用* 标明，退火时产生额外条带。65°C加热5分钟后冰浴3分钟可使此类条带分离。
- 短片段(斜体)在常规电泳时无法显示，其片段长度是根据DNA序列由计算机预测出来的。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验Recombineering/Lambda red-mediated gene replacement
Electroprate linear DNA into electrocompetent cells Grow at 37°C on chloramphenicol plates PCR verify the deletion with oligos C and D (see below for design) Detailed procedure Day 0: Start overnight culture
糖凝胶分离的范围 试剂： (1)1 X TAE电泳缓冲液：45mmol/Ltris-硼酸，1mmol/LEDTA，pH8.0 (2)凝胶加样缓冲液：0.25%溴酚蓝，40%蔗糖水溶液。 (3)λ-DNA和提取的DNA λ-DNA是λ噬菌体的基因组DNA，全长50kb。用HindIII或(和)BamHI酶切得到的片段被广泛用于DNA电泳的分子量标准。 (4)分子量标准(&lambda
+HindIII对质粒DNA进行双酶切，以便进行某基因的克隆。 那么，我们建议，同时设计并进行三种酶切反应： A: EcoRI+HindIII 双酶切 B: EcoRI单酶切 C: HindIII单酶切 在酶切时，ABC三种酶切反应都用相同的buffer系统，相同的DNA量（建议至少0.5ug）， 所需的酶量用DDDesigner进行计算。在合适的温度（37度）酶切1-2个小时， 然后进行电泳分析。电泳分析时，添加两种对照：D:未酶切的质粒DNA和分子量标准
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