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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
24个月
- 英文名:
Minute(TM) Total Protein Extraction Kit for Blood Vessels
- 供应商:
西宝生物
- 规格:
50tests
描述:血管组织(动脉和静脉)都是由特殊的结缔组织构成, 血管中有三层组织:膜、中膜和内皮。由于其独特的结构,血管组织非常难研磨匀浆,在提取总蛋白时也很难裂解。使用传统的溶液法提取蛋白质如RIPA,效率低,产率也很低,提取的蛋白质的图谱也是不完整的。本试剂盒利用离心管技术以及优化的裂解液,利用物理研磨和化学裂解相结合,提供了一种简单和快速的从人或动物血管组织中提取蛋白质的高效方法。可以根据特定的下游应用选择变性细胞裂解缓冲液或天然细胞裂解缓冲液。整个过程不到10分钟即可完成,蛋白质得率在1-3mg/ml。试剂盒所提供试剂及耗材可以满足客户50个样品实验。
应用:SDS-PAGE, WB,IP,ELISA,酶活性测定和蛋白质组学分析。缓冲剂与IMAC树脂兼容,可用于His标签蛋白纯化。在质谱分析之前需将提取的蛋白质样品中的盐和表面活性剂除去。
储存条件:常温
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文献和实验E. Z. N.A.TM X-press Plasmid Protocol
than 3.0. For example: If the OD600 of the culture is 2.0, use a 1.5 ml bacterial culture. 3. Discard medium and remove any remaining liquid in the tube by using a pipettor or inverting the tube on an absorbent paper for 1 minute . 4. Add 500μl ICE-COLD
如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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