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-20℃储存
- 保质期:
24个月
- 英文名:
Minute(TM) Plasma Membrane Protein Isolation Kit for Plants
- 供应商:
西宝生物
- 规格:
50tests
描述:植物膜蛋白占植物细胞总蛋白的很小一部分,但是在植物生理学中起着非常重要的作用。传统的植物膜蛋白分离纯化方法是蔗糖密度梯度离心法和双液相法。这些方法虽然比较有效,但是需要超高速离心和大量的起始原材料,操作过十分繁琐和费时。为了克服植物膜蛋白提取中的缺点,我们特别开发了此款植物膜蛋白提取试剂盒。植物组织首先通过缓冲液 A 中致敏,匀浆,然后通过一个特殊的离心管柱,在此过程中匀浆的组织通过柱子特有的 Z 字形通路后细胞膜被切割成大小相等的碎片,后续无需超高速离心,通过差速离心法和密度梯度离心法将天然的质膜蛋白从未破裂的细胞,细胞核,细胞质和细胞器的混合物中分离出来。在每次实验中仅需使用相同量的起始材料,离心力和离心时间,即可高度富集膜蛋白,并保证一致性良好。整个操作过程大约 1 小时可以完成。
应用:试剂盒用于快速从植物组织中分离天然膜蛋白,可应用于 SDS-PAGE,immunoblottings,ELISA,IP,膜蛋白质结构分析,2-D,酶活性测定及其他应用。
储存条件:-20℃储存
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文献和实验E. Z. N.A.TM X-press Plasmid Protocol
than 3.0. For example: If the OD600 of the culture is 2.0, use a 1.5 ml bacterial culture. 3. Discard medium and remove any remaining liquid in the tube by using a pipettor or inverting the tube on an absorbent paper for 1 minute . 4. Add 500μl ICE-COLD
如果您的样本是组织,取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的,组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用,RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻,之后转移至 -80℃ 长期保存,且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中,保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量,上样量过多,同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞,则样本搜集过程要简单的多了,只要保证细胞状态良好(细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解
,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
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