- ￥180
- 翌圣生物（Yeasen）
- 36201ES03
- 上海翌圣
- 2025年12月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
3,3'-Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB)
- CAS号：
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- 保质期：
有效期3年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃干燥避光保存
- 规格：
1g
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
| 3,3'-Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) |
36201ES03 | 1 g | -20℃干燥避光保存 | 180.00 |
产品描述
DAB即3,3’-diaminobenzidine，辣根过氧化物酶（Peroxidase）最常用的生色底物，其显色原理是在过氧化氢的作用下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成棕色不溶性产物，该反应灵敏度高、特异性好，常用于免疫组化、原位杂交、Western Blot等膜显色或检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。由于生成的显色产物不溶于乙醇，因此，在DAB显色后，还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。可配合DAB染色使用的复染方法包括亚甲基蓝、甲基绿和hematoxylin。DAB，也称硒试剂，可用于分光光度法检测硒含量。
本品为四盐酸盐形式的DAB，易溶于水，可制备成1%储存液，-20℃分装冻存。然后使用前用合适pH的缓冲液（pH7.0~7.6）稀释到工作液，并与过氧化氢（H2O2）工作液混匀，即得到完整的DAB显色液。
产品性质
| 中文别名（Chinese Synonym） | 硒试剂 |
| 引文别名（English Synonym） | Tetrahydrochloride |
| 分子式（Formula） | C12H14N4·4HCl·xH2O |
| 分子量（Molecular Weight） | 360.11 (anhydrous basis) |
| 熔点（Melting Point） | 328-330℃ |
| 外观（Appearance） | 白色结晶粉末 |
| 纯度（Purity） | ＞98% |
| 溶解性（Solubility） | 溶于水，DMF，DMSO |
| 结构式（Structure） |  |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃干燥避光保存，3年有效。
使用方法
取10 mg粉末于15mL 1X TBS, pH 7.4，之后于使用前加入12 μL新鲜的30%过氧化氢（H2O2）溶液，混匀后过滤除杂进行生色检测。
【注意】
a，可根据特定实验要求调整DAB和H2O2的浓度，以及缓冲液体系。镍离子，钴离子或银离子的加入可增强DAB的染色强度，可根据具体应用进行适量加入；
b，也可先用去离子水溶解粉末制备1%的储存液，-20℃分装冻存。条件允许情况下请新鲜配置DAB溶液。并且一定要在实验前才制备完全的DAB显色液，过滤除杂。当天使用完。
c，DAB工作液的pH很重要，pH < 7.0会降低染色强度，pH > 7.6会导致高背景。最佳染色体系pH控制在7.0~7.6之间。
注意事项
1）DAB可能具致癌性，请小心操作，避免直接接触。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验化酶活性。 3，3， ―二氨基联苯胺(3，3， ―diaminobenzidine，DAB)在细胞色素氧化酶的催化下，其侧链氨基被氧化，并进行反复氧化性聚合和氧化性环化，形成不溶性褐色吩嗪(phenazine)聚合体，DAB将氧化型细胞色素C还原，还原型细胞色素C又被细胞色素a再氧化。通过该循环的反复进行，DAB不断被氧化，反应氧化物沉积。DAB氧化物含有活性游离基，该游离基能使四氧化锇还原形成锇黑，故可在电镜下观察。 (1)孵育液配制 蒸馏水 5ml
化物酶，然后用PBS洗涤三次，每次 5min。4 ） 加入一抗（用3%BSA-PBS封闭液1:50稀释一抗），37℃湿盒孵育1h。5 ） 加入Post-blocking室温湿盒孵育30min,然后用PBS洗涤三次，每次5min。6 ） 加入稀释好的辣根过氧化物酶（HRP）标二抗，室温下湿盒孵育30min。7 ） 用PBS洗涤玻片5次，每次5min。8 ） 按照DAB试剂盒说明添加显色液，避光显色30s-5min。用蒸馏水终止显色反应。9 ） 苏木精进行复染色3min,用蒸馏水冲洗。10
（1）DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗； （2）DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗 体孵育时间； （3）此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间； （4）DAB显色时间很长（如超过十几分钟）才出现
