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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20ºC避光保存
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
DAPI Stain Solution (5 mg/mL)
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号:
点击查看
- 规格:
1mg(200μl)
DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种常用的核酸染料,可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合,产生比自身强20多倍的蓝色荧光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI也可对RNA进行染色,染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500 nm),其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。
尽管DAPI不能通过活细胞膜,但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色体DNA。
DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术,因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域,其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
本产品为溶液,浓度为5 mg/mL。另外提供粉末形式的DAPI(Cat No. 40727ES10)供客户选购。
产品性质
|
英文名称(English Synonym) |
4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride |
|
CAS号(CAS NO.) |
28718-90-3 |
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分子式(Molecular Fomular) |
C16H17Cl2N5·2HCl |
|
分子量(Molecular Weight) |
350.25 |
|
荧光光谱(Fluorescence Spectral) |
DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm |
运输与保存方法
冰袋运输,5 mg/mL的DAPI储存液于-20ºC避光保存,1年有效。
注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)低浓度的DAPI不容易穿透细胞膜。
5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 配制工作液:
用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10 μg/mL)。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。
b) 对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm,发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色:
a) 细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
b) 在37℃培养细胞 10~20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm,发射波长460 nm。
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产品货号 |
产品编号 |
规格 |
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10 g |
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40729ES10 |
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36308ES11 |
4 mL |
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DAPI染液(5 mg/mL) |
40728ES03 |
1 mg (200 μL) |
HB200211
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验[1] Lu Y, Li Y, Liu Q, et al. MondoA-Thioredoxin-Interacting Protein Axis Maintains Regulatory T-Cell Identity and Function in Colorectal Cancer Microenvironment. Gastroenterology. 2021;161(2):575-591.e16. doi:10.1053/j.gastro.2021.04.041(IF:22.682)
[2] Yan Y, Tian M, Li M, et al. ASH1L haploinsufficiency results in autistic-like phenotypes in mice and links Eph receptor gene to autism spectrum disorder. Neuron. 2022;110(7):1156-1172.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.12.035(IF:17.173)
[3] Xu X, Han C, Zhang C, Yan D, Ren C, Kong L. Intelligent phototriggered nanoparticles induce a domino effect for multimodal tumor therapy. Theranostics. 2021;11(13):6477-6490. Published 2021 Apr 19. doi:10.7150/thno.55708(IF:11.556)
[4] Li Z, Luo L, Yu W, et al. PPARγ phase separates with RXRα at PPREs to regulate target gene expression. Cell Discov. 2022;8(1):37. Published 2022 Apr 26. doi:10.1038/s41421-022-00388-0(IF:10.849)
a 5 mg/mL DAPI stock solution (14.3 mM for the dihydrochloride or 10.9 mM for the dilactate), dissolve the contents of one vial (10 mg) in 2 mL of deionized water (dH2 O) or dimethylformamide (DMF). The less water-soluble DAPI dihydro-chloride
化丙啶(propidium iodide,P1)高。 2.溶液配制(1)0.01mol/L PBS(pH7.0):取0.1mol/L NaH2 PO4 ・H2 O 34ml、0.1mol/LNa2 HPO4 66ml、NaCl 0.9g,溶于900m1双蒸水;(2)DAPI储存液:将0.5mgDAPI溶于5.0ml PBS中,分装,低温长期保存;(3)DAPI工作液:用PBS稀释DAPI储存液,终浓度为0.1ug/ml。 3.染色程序(1)培养的单层细胞(未固定)或新鲜组织的冰冻切片等,PBS漂洗5分钟
DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4',6'-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw. Materials PBS: Sambrook et al. (Molecular Cloning ). PBTw











