肝郁脾虚动物模型

专业承接各类裸鼠、大鼠、小鼠、兔等动物模型建立以及后续检测服务，模型建立包含裸鼠皮下瘤、原位瘤、糖尿病模型、胃炎模型、急性肺损伤、肺纤维化、子宫内膜异位、白癜风、痛风、骨缺损、肝纤维化、关节炎、脓毒症、支气管哮喘、抑郁症、白血病、脑缺血再灌注、骨质疏松、酒精性肝病、学习记忆障碍、胃溃疡、急性心肌缺血、感染性休克、肝硬化等动物实验模型建立，以及后续各项检测。

  在生命科学研究领域内，进行实验研究所需要的基本条件可以总括为：实验动物、设备、信息和试剂。实验动物作为生命科学研究中的基本要素之一，在很多领域的科学研究中，充当着非常重要的安全试验、效果试验、标准试验的角色，尤其在药物有效性和安全性评价中发挥着不可或缺的作用。

  安徽乐奥贝生物技术公司可以独立开展包括大鼠、小鼠、裸鼠、豚鼠、兔等常见实验动物在内的动物造模及相关实验，现已熟练掌握近30余种不同类型动物模型的造模方法。

1. 肝郁脾虚动物模型的造模方法
   • 慢性束缚应激结合高脂饮食法
     • 原理：慢性束缚应激可以使动物产生肝郁症状，如情绪抑郁、活动减少等，这类似于中医理论中肝郁气滞的状态。同时，高脂饮食易导致脾胃运化功能失调，出现脾虚的症状，两者结合能够较好地模拟肝郁脾虚证型。
     • 具体操作：例如，采用特制的束缚筒对大鼠进行束缚，每天束缚 2 - 4 小时，持续 2 - 3 周。同时，给予大鼠高脂饲料（脂肪含量一般在 40% - 60% 左右）喂养，持续相同时间。束缚结束后，观察大鼠的行为学变化、生理指标以及病理组织学变化来评估模型是否成功。
   • 药物联合造模法
     • 原理：通过使用一些能够影响肝脏和脾脏功能的药物来诱导肝郁脾虚状态。例如，利血平可以耗竭脑内单胺类神经递质，使动物出现类似肝郁的精神抑郁状态；大黄等泻下药长期使用会损伤脾胃，造成脾虚。
     • 具体操作：以大鼠为例，采用腹腔注射利血平（剂量一般为 0.5 - 1mg/kg），同时灌胃大黄煎剂（浓度和剂量根据实验设计调整，如大黄生药浓度为 10% - 20%，灌胃量为 2 - 5ml/kg），连续给药 1 - 2 周。之后观察动物的外观行为、体重变化、胃肠功能等指标来判断模型是否建立成功。
   • 母子分离结合慢性不可预测应激法（用于幼年期肝郁脾虚模型）
     • 原理：在动物幼年期，母子分离会对其心理和生理产生长期的影响，造成情绪应激，类似于肝郁的状态。再结合慢性不可预测应激，如改变光照周期、噪音刺激、禁食禁水等多种应激源交替刺激，会进一步影响动物的消化功能，导致脾虚。
     • 具体操作：对于新生小鼠，在出生后的第 2 - 3 周内，每天将幼鼠与母鼠分离 3 - 6 小时。之后，从第 4 周开始，给予慢性不可预测应激，如每周进行 2 - 3 次禁食 12 - 24 小时、禁水 6 - 12 小时，以及不定期的噪音（80 - 100 分贝）刺激和光照周期颠倒等操作，持续 4 - 6 周。观察小鼠的生长发育、行为学和胃肠功能等指标来评估模型的建立情况。
2. 模型评价指标
   • 行为学指标
     • 活动减少和蜷缩：肝郁脾虚动物通常表现为活动频率降低，喜欢蜷缩在角落。例如，正常大鼠在旷场实验中的活动路程可达 10 - 15m，而肝郁脾虚模型大鼠活动路程可能减少至 3 - 5m。
     • 探索行为减弱：在新环境中，如在高架十字迷宫或旷场实验中的探索行为减少。正常小鼠进入新环境后会积极探索周边区域，而模型小鼠对新环境的探索兴趣明显降低，进入开放臂的次数或在旷场中心区域的停留时间减少。
   • 生理指标
     • 体重变化：由于脾胃运化功能失调，体重可能出现增长缓慢甚至下降的情况。例如，在药物联合造模过程中，大鼠体重增长幅度可能比正常对照组减少 30% - 50%。
     • 胃肠功能指标：包括胃排空率和小肠推进率下降。可以通过灌胃一定量的墨汁，观察墨汁在胃和小肠中的推进情况来检测胃肠功能。正常动物在一定时间内胃排空和小肠推进程度较高，而肝郁脾虚模型动物的胃排空和小肠推进明显减慢。
     • 肝脏和脾脏功能指标：检测血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）可反映肝脏功能，肝郁时这些酶的活性可能会有一定变化；血清淀粉酶和 D - 吸收试验可反映脾脏和胃肠的消化吸收功能，脾虚时这些指标通常会下降。
   • 组织病理学指标
     • 肝脏组织：肝郁时可能出现肝细胞脂肪变性、肝小叶结构紊乱等情况。通过 - 伊红（HE）染色可以观察到肝细胞内出现脂肪滴空泡，细胞核被挤压到一侧。
     • 脾脏组织：脾虚时脾脏的白髓和红髓界限可能模糊，淋巴细胞数量减少，脾小结体积变小等。
     • 胃肠组织：胃肠黏膜可能出现充血、水肿，上皮细胞脱落等病理变化，影响胃肠的正常消化和吸收功能。
3. 肝郁脾虚动物模型的应用领域
   • 中药复方药效评价：用于评估具有疏肝健脾作用的中药复方的疗效。例如，在模型动物上给予逍遥散等中药复方后，观察动物的行为学、生理和病理指标的恢复情况，以验证复方的药效和作用机制。
   • 发病机制研究：研究肝郁脾虚证型在疾病发生发展中的内在机制，如肝郁和脾虚之间的相互影响关系，以及它们在消化系统疾病、情志疾病等多种疾病中的作用机制。