强力水样RNA提取试剂盒 PowerWater RNA Is

PowerWater® RNA Isolation Kit专门设计用于提取各种已过滤好水样滤膜的总RNA。使用了我们专利的抑制因子去除技术（Inhibitor Removal Technology®），进验证，可从富含抑制因子的水样中获得高质量RNA。兼容市面上所有常见类型滤膜，可选用我们的灭菌过滤装置。提供了RNase-Free DNase I，提取过程中消化掉基因组DNA，节省事后处理时间。
PowerWater® RNA Isolation Kit使用前，先把水样过滤到滤膜上。可从MOBIO单独购买已消毒的带滤膜一次性过滤装置，或用户自备。把过滤好水样的滤膜放入特配研磨珠的厚壁研磨管。加入专利的裂解缓冲液以增强陷入滤膜孔内微生物的裂解作用，涡旋振荡充分均质化样品。去除蛋白和抑制因子后，总RNA选择性吸附到MOBIO的硅胶离心柱上，DNase I消化基因组DNA，经过清洗，洗脱RNA。此时，最终RNA可直接用于RT-PCR、qRT-PCR、cDNA 合成等RNA应用。
聚醚砜0.22μm滤膜提取的水样总RNA，上条带为23s rRNA，下条带为16S rRNA


凝胶电泳中RNA出现降解
β巯基乙醇可破坏RNase，需要现加现用。若依然出现RNA降解，可能要注意以下原因：

• 新鲜采样，若水样不能立刻处理，4℃保存。室温或-20℃保存，会导致RNA降解损失。
• 根据样品现用现配PWR1与β巯基乙醇混合液。
• 非变性凝胶不能跑RNA。关于变性凝胶跑RNA，详见电泳部分。
• RNA降解成小片段甚至单个核苷酸可增加260吸光值，所以260/280读数可反应RNA质量。比值大于2.3即表示RNA出现降解。

A260/280读数偏低
纯净的RNA此读数因为1.9-2.1。若比值低于1.6，表明RNA有蛋白污染。

• 检查流程，DNase I消化后必须用PWR7溶液进行冲洗。
• UV分光光度计法检测的样品水溶液pH过低也会影响280对蛋白的检测的灵敏度*。用10mM Tris pH 7.5稀释RNA，重新测定260/280.

*Wilfinger, W.W., Mackey, M., and Chomczynski, P. (1997) Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric
assessment of nucleic acid purity. BioTechniques 22, 474.

最终RNA有基因DNA污染
PowerWater® RNA Isolation Kit提供了高质量的RNase-free DNase I用于离心柱上的DNA消化。使用试剂盒提供的PWR6溶液，DNase I的活性可以充分发挥。

• 必须使用试剂盒提供的缓冲液制备DNase I。
• 保证15min的消化孵育时间。缩短孵育时间可导致基因组DNA消化不完全。孵育过程RNA不会被降解。你也可以最多把DNase I孵育效果过程延长至30min。