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- 百奥莱博
- HR0265-UJR
- 北京
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
232
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
裂解液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃
- 规格：
50ml|100ml
特别提示：包括IP细胞裂解液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：IP细胞裂解液
产品货号：HR0265
产品规格：50ml|100ml
IP组织细胞蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物zuì大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀等。
储存条件：裂解液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。
注意事项：
1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2．整个过程须保持样品处于低温状态。
3．如果试剂不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
4．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
使用方法：
根据样本数量，每500μl裂解液中加入1μl蛋白酶抑制剂。
A．细胞裂解
1．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75cm2培养瓶加1～2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
4.在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
3．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11：使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子，而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行，在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白，从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白，然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析，从而确认互作
某个实验间隙… 萌新：开题报告已提交，转眼 1 个月过去了，实验还是一头雾水，为啥我的 co-IP 拉不下来蛋白？ 奋斗中的师兄：我当初正好相反，拉下来的蛋白被抗体条带覆盖住了，换个抗体忒不好找，无奈换了个蛋白，还好挺顺利。 大师兄：蛋白吧，不但种类多，理化性质差异较大，关键它们又喜欢组队在细胞里干活，IP、co-IP 又是常用的手段，掌握好这个工具还是很重要的，总不能随随便便就换个蛋白。 那要怎么快速掌握这项实验，轻松搞定各种疑难杂症呢？ 我们依据三十多年的 IP/co-IP 实验经验，总结
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