人皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-1)

人皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-1)
细胞介绍：
该细胞由Oettgen F及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤 的白人男性患者的胸导管中分离建立的。该细胞可产生黑色素，电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。

细胞特性：
1)来源：皮肤黑色素瘤
2)形态：球形，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

人皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-1)运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 MEM-EBSS 培养基(Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle ’ s Balanced Salts) (MEM-EBSS))( MEM，GIBCO,41500034,添加 EBSS)，90%;
胎牛血清，10%
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为95%。
3.冻存液：90%完全培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

人皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-1)细胞传代：
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO 后进行冻存。

注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。