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- 哺乳动物细胞瞬时表达服务
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- 2025年08月12日
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北京义翘神州科技股份有限公司
- 服务名称：
哺乳动物重组蛋白表达服务
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哺乳动物细胞表达系统是复杂糖基化蛋白的表达系统，哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰功能，其表达的重组蛋白在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子，更有可能获得与天然分子相同的生物活性。
义翘神州的哺乳动物瞬时表达系统以HEK293细胞和CHO细胞为表达宿主，可提供灵活的服务以满足不同的定制需求，包括标签去除、内毒素去除、SEC-HPLC检测、糖基化分析等。专有的高密度细胞培养技术，结合自主产权的转染试剂和培养基配方，以及高效表达载体，实现降本增效，提高表达成功率，帮助客户节省成本。
哺乳动物细胞蛋白表达服务内容
哺乳动物蛋白表达服务流程
蛋白瞬时表达服务案例
在HEK293细胞中瞬时表达目的蛋白
客户评价
| 2022/8/10 项目经理愿意积极与他们的技术讨论，可以根据客户的需求给出不同的表达构建建议，尽量满足客户的表达需求。 卫*雪 |
2022/5/9 我们了解到义翘在蛋白表达方面是非常权威的，拿到的蛋白都是活性不错的，最近还有一些蛋白在筛选，后续还会有更多合作机会。 袁* |
| 2022/2/6 |
2021/6/22 义翘帮忙免费做了密码子优化，还用了专有信号肽，获得的蛋白用于检测很好用。 季*华 |
更多重组蛋白表达服务
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| 原核 (E. coli) 蛋白表达服务 | 杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务 | HEK293/CHO 稳定细胞株开发服务 |
哺乳动物细胞瞬时表达的常见问题解答
如何选择哺乳动物瞬时表达系统，HEK293 还是 CHO？
由于具有易于转染、蛋白表达水平高和工作流程稳定的特点，因此人胚胎肾细胞 (Human Embryonic Kidney 293 Cell, HEK293) 是哺乳动物细胞蛋白瞬时转染的细胞系。但当开发治疗性蛋白或者治疗性抗体的商业化重组生产时，中国仓鼠卵巢细胞 (Chinese Hamster Ovary Cell, CHO) 是的细胞系。大约 70% 获批的生物治疗蛋白是在稳定转染的CHO细胞中产生的。
| HEK293 | CHO |
| ·易转染，转缺效率高 ·适用于悬浮培养 ·瞬时表达 ·可靠且灵活的细胞生长 |
·难转染，转染效率低 ·适用于悬浮培养 ·瞬时表达和稳定表达 ·稳转重组蛋白产量高和Qp (细胞单位生产率) 高 |
什么情况下建议选择哺乳动物表达系统？
哺乳动物表达系统能够进行蛋白质折叠和完整的翻译后修饰（例如糖基化、磷酸化等）。哺乳动物细胞表达的重组蛋白，其分子结构、理化结构和生物学功能大多接近于天然蛋白。当目的蛋白属于这种情况，推荐使用哺乳动物表达系统。
HEK293和HEK293T有什么区别？
在原代人胚肾细胞转入了一段修改后的5型腺病毒DNA片段，得到的细胞即为HEK293细胞。HEK293的衍生株包括HEK293T、HEK293E、HEK293A和HEK293F 等。在HEK293细胞中转入SV40 (Simian Virus 40) 大T抗原，得到的细胞即为HEK293T细胞。HEK293T具有新霉素抗性和对温度敏感。
HEK293T细胞能稳定表达SV40大T抗原。包含SV40复制起点的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。HEK293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于病毒蛋白生产。
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文献和实验在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计，实验和分析siRNA效应
在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计，实验和分析siRNA效应 转录后基因沉默，也称为RNA干扰，是指双链RNA分子阻断或者降低同源基因的表达的现象。这种现象可能是作为一种抑制病毒感染和转座子跳跃的细胞防御机制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratcliff et. al., 1999)。在体内，双链RNA被内源的核糖核酸酶降解为21-23个碱基大小的小分子干扰RNA（small
型的蛋白，或进行高解析度的结构分析，愈来愈多的实验组选择哺乳类表达系统来生产融合蛋白。其原因为哺乳动物细胞生产出的重组蛋白与人类蛋白十分相似，有较完整的蛋白折叠、组合及翻译后修饰[3]。因此，愈来愈多科学家们更加关注于—如何从哺乳类细胞中高效的纯化目标蛋白。1 亲和标签的选择首先，需考虑选择合适的亲和标签。常用于哺乳动物表达系统的亲和标签有 His-tag、FLAG-tag、GST-tag及 Strep-tag® 等[4-12]，整理于下表：（点击放大查看）这些亲和标签在使用上各有千秋。使用
将制备好的siRNA、siRNA 表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种：磷酸钙共沉淀；电穿孔法；DEAE-葡聚糖和polybrene；机械法；阳离子脂质体试剂。目前用的最多的是阳离子脂质体法。
