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杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务
- 提供商:
北京义翘神州科技股份有限公司
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询价
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务
义翘神州提供杆状病毒-昆虫蛋白表达的一站式服务。杆状病毒-昆虫细胞表达系统具有经济、易于放大培养和高表达水平等优势,是应用较广泛的真核表达系统之一。其翻译后修饰类似于哺乳动物细胞,适用于表达一些可能对哺乳动物宿主细胞产生负作用的蛋白,如激酶以及毒性蛋白等。凭借优化的表达载体和更高滴度的病毒包装技术,义翘神州在杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达方面具有丰富的经验,特别是针对序列较长的蛋白、病毒类蛋白、激酶、胞内蛋白以及膜蛋白等。
昆虫细胞蛋白表达服务内容

杆状病毒蛋白表达服务流程

杆状病毒-昆虫细胞表达服务案例
利用杆状病毒载体表达系统进行目的蛋白的表达和纯化,并按客户要求交付最终产品。SEC-HPLC、SDS-PAGE和细胞活性分析的QC结果如下所示。
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| SDS-PAGE>97% | SEC-HPLC>93% | Cell-based activity assay: EC50=7ng/mL |
客户评价
| 2022/6/7 之前一个蛋白在原核系统没有表达,跟以前的技术沟通后给出了昆虫系统尝试的建议,最终在昆虫系统表达成功。终于有蛋白可以继续向下进行实验,卡了很久的项目终于能完成了。 谢*彤 |
2022/3/14 我的Fab在义翘利用昆虫细胞表达出来了,其他公司推荐用哺乳细胞,但我由于后期特殊应用,还想用昆虫系统,有昆虫系统并且做得好的不多,感谢义翘。 童*妍 |
| 2022/1/22 我的蛋白很大,义翘推荐了昆虫系统,成功获得蛋白。 张*克 |
2022/1/21 一个关键蛋白试了几家cro哺乳细胞表达都做不出来,经朋友推荐尝试义翘的昆虫系统,竟然做出来了,简直帮了我大忙。 庞*雪 |
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达常见问题解答
昆虫细胞Sf9、 Sf21和H5有什么区别?
昆虫杆状病毒表达系统常用的昆虫细胞系包括Sf9、Sf21和H5(High Five)。其中Sf9、Sf21 来源于草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda),H5来源于粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)。
| 昆虫细胞系 | 来源 | 特点 | 应用 |
| Sf9和Sf21 | 草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda) | ·易于形成单层和在悬浮培养中生长良好 ·适用于无血清培养基 |
两种细胞系都适用于转染、噬菌斑纯化和形成、高滴度病毒的生产以及一般类型重组蛋白的表达。 |
| H5 | 粉纹夜蛾( Trichoplusia ni) | ·倍增时间小于24h ·适用于贴壁培养,但易形成不规则的单层,导致斑块更难以鉴别 ·适用于息浮培养和无血清培养基 ·分泌表达量比Sf9细胞更高 |
H5细胞可以表达高质量的重组病毒,广泛用于转染和噬菌斑纯化。H5细胞系更适合表达分泌型重组蛋白。 |
杆状病毒表达系统有哪些优势?
杆状病毒表达系统是属于真核表达系统,在蛋白质表达方面具有许多优势,比如容纳大量DNA插入片段、相对较高的表达水平以及类似于哺乳动物细胞的真核蛋白质修饰等。 杆状病毒表达系统是结构分析中最常用的表达系统。
项目结束后,我将收到哪些可交付成果?
项目完成后,您将收到纯化蛋白和质量检验报告(CoA)。 对于复杂项目,您还将收到一份详细的项目报告。
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文献和实验【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统,影响蛋白表达的因素?
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时,却未见蛋白表达,同时进行的试剂盒对照(含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。 我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的,但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统,除了实验操作失误方面的原因,还有什么因素是不使蛋白表达的,请大家讨论一下。 下面是我的实验过程,请高手指教,同时希望也给新手一个指导
ysh2006 我现在手上有一个携带杆状病毒一凋亡抑制基因(此基因属于凋亡抑制基因家族成员,其家族其它已发现的成员均在人肿瘤组织中有表达,并具有或多或少的临床意义,这是我们选择此基因的依据)的质粒,在昆虫细胞中证实此基因具有抑制凋亡的功能。我准备做如下实验:质粒扩增、转染入肺癌细胞株,验证其是否具有抑制肺癌细胞凋亡功能,如果有表达,则继续行动物实验验证,最后一步检测其在人肺癌标本中的蛋白表达及其与临床病理特征之间的关系。 问题:此病毒基因仅仅在昆虫细胞
哺乳动物表达系统是适用于生成具有天然结构和活性的哺乳动物蛋白的首选表达平台,可以实现最高水平的翻译后加工,使蛋白质获得最佳功能活性,适合在最类似生理学的环境中研究特定蛋白质的功能。它常用于抗体和治疗性蛋白质以及人类功能细胞分析的蛋白质表达。 和稳定表达相比,哺乳动物瞬时表达系统可实现灵活且快速的蛋白质生产,可以在 1-2 周内生成大量蛋白质,适用于人或其他哺乳动物蛋白的表达,和大肠杆菌、酵母或昆虫细胞等宿主表达系统相比,可实现更天然的折叠和翻译后修饰——包括糖基化(图 1)。 图 1、哺乳动物蛋白表达













