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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(250T)
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
2500微孔
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(250T)规格价格优惠,品质保证,库存现货,无效果,免费退款。公司现货销售,量大折扣,欢迎来电咨询。详细信息如下
| 产品名称 | Bradford蛋白浓度测定试剂盒(250T)规格 |
| 规格 | 2500微孔 |
| 单位 | 盒 |
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均 匀,涂成薄层。
3、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、 干燥。镜检:置油镜观察。 染色结果: 革兰氏阳性菌:蓝色至紫色;革兰氏阴性菌:红色。
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(250T)规格使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法:
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开:
当螺旋瓶盖拧不开时,可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围,使其受热膨胀,再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢:
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
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(一)实验原理双缩脲法(Biuret法)和Folin�酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,溶液的颜色
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