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- 活动依赖RAM结合Tet-off系统
- 武汉
- 2026年04月26日
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- 文献和实验
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- 提供商：
BrainVTA
- 服务名称：
AAV病毒服务
- 规格：
100ul
血清型：9型，其他；
名词释义：
RAM： optimized synthetic activity-regulated promoter，优化合成的活动依赖启动子。
d2TTA： using d2tTA led to significantly lower basal expression (Figure 1—figure supplement 3e), tighter Dox regulation (Figure 1g), and improved fold induction by a factor of 7–8 compared with conventional tTA (Figure 1g).Figure 1f shows the final design of the RAM system AAV vector.
图1.RAM启动子(PRAM)和rAAV-RAM系统的设计图。
参考文献
eLife
PMID: 27661450
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文献和实验一文吃透Notch信号通路｜从机制到科研热点，新手也能快速入门
看！ Notch信号通路 (Notch signaling pathway) Notch信号通路是一类进化高度保守、依赖细胞间直接接触的信号传导系统，核心功能是调控细胞命运。它无需复杂级联放大，仅通过相邻细胞表面的受体-配体直接结合，就能快速传递信号，调控细胞增殖、分化、凋亡等关键生命活动，是胚胎发育和成体组织稳态维持的核心，也与多种疾病相关。 Notch信号通路的成员— 四大“关键成员”缺一不可 Notch通路的正常运转，依赖四大核心组件的协同作用，就像一台机器的不同零件，各自承担专属功能，缺一不可
激活因子(fIA)的序列，在没有四环素或强力毒素存在的情况下 tTA可引起下游目的基因表达。随后Gossen等又对tTA的氨基酸序列进行了改造，构建了受四环素正调节的Tet-on基因表达系统，该系统在没有四环素的情况下启动子不被激活，而在加入四环素或强力毒素后目的基因高效表达。四环素诱导的基因表达系统是目前应用最广泛的哺乳动物细胞诱导表达系统，该系统具有严密、高效可控制性强的优点。 外源蛋白的表达会对哺乳动物细胞产生不利影响，因此利用哺乳动物细胞表达外源基因时，一个主要问题便是外源基因不能持久稳定
，这样可避免表达产物产生早期就对细胞产生影响。哺乳动物细胞中用到的诱导型载体主要与启动子有关如热休克蛋白启动子可在高温下被诱导，还有重金属、糖皮质激素诱导的启动子。但这些系统存在一些共同的缺陷，如诱导表达特异性差;当系统处于关闭状态时表达有泄漏诱导剂本身有毒性，常对细胞造成损伤等。 为此，Gossen等构建了受四环素负调节的Tet-on基因表达系统，该系统由调节质粒和反应质粒组成。调节质粒中具有编码转录激活因子(fIA)的序列，在没有四环素或强力毒素存在的情况下 tTA可引起下游目的
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