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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
BrainVTA
- 服务名称:
红移钙离子成像探针
- 规格:
100ul
血清型:9型,其他;
名称释义:
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
hSyn:human Synapsin I,成熟神经元特异性启动子。
jRGECO1a: NES-RCaMP1h variant 1519;Activity in mice, flies, fish and worms小鼠,苍蝇,鱼,蠕虫;deeper into the brain, and could also be used with green probes to image the activity and interactions of different neuron types simultaneously深层大脑成像,可与Gcamp绿色荧光系列同时使用,用于研究不同类型神经元的活动和相互作用。缺点:现有的红色荧光探测器没有绿色的好用。reduced scattering and absorption in tissue, and a consequent reduction in phototoxicity减少散射和组织吸收,进而光毒性降低。用于研究深层组织。
参考文献
Neuron
PMID: 29731250
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文献和实验作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
操控工具。如基因编码的钙指示剂 (GECIs: GCaMP, jRGECO1),基因编码的电压指示器 (Voltron, GEVIs: SomArchon),神经递质探针 (如 DA/Ach/NE/ iGABASnFR) 和光遗传 / 化学遗传元件 (如 ChR2, eNpHR, hM3Dq, hM4Di) 很容易被包装并通过 AAVs 传递。rAAV 是表达小基因序列的理想载体,借助其,我们可以对细胞内的基因进行操作,包括基因功能获取(Gain of function)和基因功能缺失(Loss
病毒载体(rAAV)的构建通常涉及rep和cap基因的剔除和将感兴趣的转基因插入TR元件之间。产生的载体质粒随后与一个表达AAV的rep和cap基因的包装质粒一起共转染到组织培养细胞中。质粒转染的组织培养细胞被感染Ad以提供辅助功能以有效复制AAV和基因表达。几天后收获培养物,并利用柱层析或多轮超速离心纯化rAAV。60°C加热灭活任何残留的Ad。关键的Ad辅助基因包括:E1a转录激活Ad以及AAV基因,E1b和E4编码增进mRNA装运到细胞质的蛋白质,E2a表达一个ssDNA结合蛋白质促进AAV DNA复制
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