- ￥1650
- Solarbio
- 北京
- BC4025
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Soil Leucine Arylamidase(S-LAP) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC4025-100T/48S
- 规格：
100管/48样
土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4025
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂二：临用前取1瓶加入1.875 mL丙 酮溶解，用不完的试剂2-8℃保存一周。
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基 苯胺生成对硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯（不允许快递）、丙 酮（不允许快递）、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
取新鲜土样自然风干或37℃烘干，过30-50目筛。
二、测定步骤
- 分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，分光光度计蒸馏水调零。
- 加样表：
| 测定管 | 对照管 | |
| 风干土样（g） | 0.03 | 0.03 |
| 甲苯（μL） | 15 | 15 |
| 震荡混匀，室温静置15min。 | ||
| 试剂一（μL） | 255 | 255 |
|
|
30 | - |
| 置于30℃水浴锅准确反应1h后，立刻煮沸5min（盖紧，缠封口膜，防止崩开水分散失）。流水冷却至室温。 | ||
| 试剂二（μL） | - | 30 |
| 14000g，常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。 | ||
实验实例：
- 称取两管0.03g三叶草土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.6-0.17=0.43，计算酶活得：
- 称取两管0.03g土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.569-0.128=0.441，计算酶活得：
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文献和实验| AuthorXiangyang Shu, Weijia Liu, Yufu Hu, Longlong Xia, Kunkun Fan, Yanyan Zhang, Yulin Zhang, Wei Zhou | Publish_toFrontiers in Plant Science |
| IF5.6000 | PMID37593047 |
球滤过一部分，从尿中排出，肾脏严重疾病时AMY升高也证实此一推论。但对于大多数酶而言，这种清除机制显然是不存在的。 过去曾强调，通过胆汁可能排泄一部分酶，并认为这是梗阻性黄疸时，血中ALP、亮氨酸氨基肽酶（LAP）的升高机制。而目前更多倾向认为此时升高机制是肝细胞受刺激合成更多的酶，因为如给以抑制蛋白合成的药物，虽有黄疸，这些酶也不升高。 目前有人强调单核吞噬细胞系统在清除酶中的作用，它们可将酶迅速吞噬入细胞中，并进一步分解破坏。有学者用Riley病毒选择性地感染小鼠单核吞噬
（一）检测原理 血细胞比容（Hct、Ht、HCT或PCV）是指在一定条件下，经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。 1、离心法：包括温氏法（Wintrobe法）、微量法：是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。 2、血液分析仪法：原理是当细胞通过计数小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即为细胞数量，脉冲高度为细胞体积，通过红细胞平均体积（MCV）和红细胞计数（RBC）即求得血细胞比容，Hct=MCV×RBC
行，则只需几分钟；③特异性强；④使用方便、简单。二、载体 具有吸附抗原（或抗体）的载体很多，如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。良好载体有如下几点基本要求：①在生理盐水或缓冲液无自凝倾向；②大小均匀；③比重与介质相似，短时间内不能沉淀；④无化学或血清学活性；⑤吸附抗原（或抗体）后，不影响其活性。目前应用最广的是人的O型红血球和绵羊红血球。而后者应用更广，因为其来源方便。另外绵羊红血球的表面有大量的（约1000个以上）糖蛋白受体，极易吸附某些抗原物质，吸附性能好，且大小均匀
