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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Soil Glutaminase(S-GLS) Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC3975-100T/48S
- 规格:
100管/48样
检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC3975
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体30mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三A | 液体0.4mL×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂三B | 液体1.6mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体2mL×1瓶 | 常温保存 |
| 标准品 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二:临用前取1瓶加入6mL蒸馏水溶解,用不完的试剂2-8℃保存一周;
- 试剂三:临用前根据样本量按比例(A:B=1:4)配制,现配现用;若发现变色后则不能再使用;
- 标准品:10µmol/mL氮标准液。取15μL 10µmol/mL氮标准液,加入945μL蒸馏水,充分混匀,配制成0.156μmol/mL的标准液待测。(实验中每管需要80μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
S-GLS(EC3.5.1.2)存在于某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用靛酚蓝比色法测定氨增加的速率,即可计算其酶活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30~50目筛、研钵、甲苯(不允许快递)、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤
- 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至630nm,分光光度计用蒸馏水调零。
- 样本测定(在EP管中加入下列试剂)
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 风干土样(g) | 0.05 | 0.05 | - | - |
| 甲苯(μL) | 25 | 25 | - | - |
| 充分震荡后常温静置10min。 | - | - | ||
| 试剂一(μL) | 275 | 275 | - | - |
| 试剂二(μL) | 200 | - | - | - |
| 蒸馏水 | - | 200 | - | 80 |
| 充分混匀,37℃水浴或恒温培养箱培养1h。10000g常温离心10 min,取上清液于96孔板或者1.5mL EP 管中。 | - | - | ||
| 上清液 | 80 | 80 | - | - |
| 0.156μmol/mL标准液 | - | - | 80 | - |
| 试剂三 | 16 | 16 | 16 | 16 |
| 试剂四 | 12 | 12 | 12 | 12 |
| 蒸馏水 | 92 | 92 | 92 | 92 |
注意事项:
- 当测定吸光值大于0.8时,建议将上清液用蒸馏水进一步稀释后测量。计算时乘以稀释倍数。
- 离心后若上清液仍含有少量杂质,可将上清液再次10000g,常温离心10min去除。
- 称取两管0.05g三叶草土,分别为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用96孔板测定吸光值,计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.8-0.175=0.625,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.268-0.044=0.224,计算酶活得:
- 称取两管0.05g林土样,分别为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用96孔板测定吸光值,计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.466-0.164=0.302,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.268-0.044=0.224,计算酶活得:
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酰胺酶的一种,是一种催化 L-β -谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨的反应的酶。 EC. 3. 5. 1. 2,在某些细菌、植物根中也含有此酶,但在高等动物中此酶的活性强。在动物肾脏和肝脏的酶,最适 pH为 8.0,在脑皮质和网膜的酶,最适 pH为 8— 9,在性质上有差异。取自大肠杆菌的酶, pH为 4.7— 5.1。此酶可受谷氨酸的阻抑,并且具有可被磷酸盐活化的和不活化的二种。在生物体内其从末梢组织转移来的谷氨酰胺生成的氨,具有调节体内碱贮(肾脏)和尿素的合成(肝脏)作用
S-腺苷甲硫氨酸 S- adenosylmethionine 亦称活性甲硫氨酸,在生物体内由 ATP与甲硫氨酸在甲硫氨酸活化酶的作用下合成。甲硫键是高能键,另外其丙基胺部分也加入到多胺化合物中。当胆碱、肌酸及其它甲基化合物生成时它作为甲基供体而起作用。认为甲硫氨酸的分解也经过此物质。
人 组织转谷氨酰胺酶(tTG) 酶联免疫 分析 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中 组织转谷氨酰胺酶(tTG) 的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双 抗体 夹心法测定 标本 中 人 组织转谷氨酰胺酶(tTG) 水平。用纯化的 人 组织转谷氨酰胺酶(tTG) 抗体 包被微孔板,制成固相 抗体 ,往包被的微孔中依次加入 组织转谷氨酰胺酶(tTG) ,再与HRP 标记










