Z-VAD-FMK

背景说明

Z-VAD-FMK是一种不可逆的 pan-caspase 抑制剂。是泛素 C 末端水解酶 L1 (UCHL1) 抑制剂。

生物活性

Z-VAD(OMe)-FMK 是一种可渗透细胞的不可逆 pan-caspase 抑制剂。Z-VAD（OMe）-FMK是一种广谱半胱天冬酶抑制剂，已被证明可抑制半胱天冬酶样蛋白酶的细胞内活化。[1-3]

In Vitro

注射Z-VAD(OMe)-FMK可抑制肺组织中caspase-3的活性，并显著降低末端dUTP缺口末端标记阳性细胞的数量[1]。在SAH之前1小时和之后6小时腹膜内施用Z-VAD(OMe)-FMK。检查胱天蛋白酶-3和阳性TUNEL的表达作为细胞凋亡的标志物。 Z-VAD(OMe)-FMK抑制内皮细胞中的TUNEL和caspase-3染色，降低caspase-3活化，降低BBB通透性，缓解血管痉挛，消除脑水肿，并改善神经功能[2]。 Z-VAD(OMe)-FMK是一种细胞渗透性半胱天冬酶抑制剂，可有效阻断SMN缺乏引起的细胞死亡[3]。

In Vivo

注射Z-VAD(OMe)-FMK可显著延长小鼠的存活率。所有小鼠在30小时内死于LPS。相比之下，用Z-VAD(OMe)-FMK治疗的小鼠存活时间显著更长，27％的小鼠存活超过7天[1]。

动物实验

小鼠[1]本研究中使用的小鼠是5至6周龄(20至22克)ICR男性。通过尾静脉从大肠杆菌血清型O111：B4向小鼠注射30mg/kg LPS。在LPS注射前15分钟进行单次静脉内注射Z-VAD(OMe)-FMK(0.25mg)，然后每小时静脉内注射三次Z-VAD(OMe)-FMK(每次0.1mg)。对照小鼠用无菌盐水中相同体积的1％DMSO注射。大鼠[2]用α-氯-醛糖(40mg/kg IP)和尿烷(400mg/kg IP)麻醉重300-350g的雄性Sprague-Dawley大鼠。对动物进行插管，并用小型动物呼吸器维持呼吸。使用加热垫将直肠温度维持在37±0.5°C。分离左外颈动脉，并通过颈内动脉插入4.0单丝尼龙缝合线以穿透大脑中动脉。在每只大鼠尸检时确认SAH。假手术的大鼠经历相同的程序，除了在感觉到抵抗后撤回缝合线。在SAH诱导前1小时和6小时腹膜内注射Z-VAD(OMe)-FMK(每0.3mL50μM)。在赋形剂组中，对大鼠进行SAH诱导，并用相同体积的载体(在生理缓冲液中稀释的DMSO)处理。在假手术动物中不进行任何治疗。

数据来源文献

[1]. Kawasaki M， et al. Protection from lethal apoptosis in lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice by a caspaseinhibitor. Am J Pathol. 2000 Aug;157(2):597-603.
[2]. Park S， et al. Neurovascular protection reduces early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Stroke. 2004 Oct;35(10):2412-7.
[3]. Ilangovan R， et al. Inhibition of apoptosis by Z-VAD-fmk in SMN-depleted S2 cells. J Biol Chem. 2003 Aug 15;278(33):30993-9.