- ￥3250
- Solarbio
- 北京
- BC3970
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
- 库存：
现货
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC3970-50T/24S
- 规格：
50管/24样
土壤谷氨酰胺酶（S-GLS）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC3970
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三A | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂三B | 液体4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体5 mL×1瓶 | 常温保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二：临用前取1瓶加入6 mL蒸馏水溶解，用不完的试剂2-8℃保存一周；
- 试剂三：临用前根据样本量按比例（A:B=1:4）配制，现配现用；若发现变色后则不能再使用；
- 标准品：10 µmol/mL氮标准液。取8μL 10µmol/mL氮标准液，加入1016μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.078μmol/mL的标准液待测。（实验中每管需要400μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用靛酚蓝比色法测定氨增加的速率，即可计算其酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30~50目筛、研钵、甲苯（不允许快递）、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤
- 分光光度计预热30min以上，调节波长至630nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 风干土样（g） | 0.1 | 0.1 | - | - |
| 甲苯（μL） | 50 | 50 | - | - |
| 充分震荡后常温静置10min。 | - | - | ||
| 试剂一（μL） | 550 | 550 | - | - |
| 试剂二（μL） | 400 | - | - | - |
| 蒸馏水 | - | 400 | - | 400 |
| 充分混匀，37℃水浴或恒温培养箱培养1h。10000g常温离心10 min，取上清液待测。 | - | - | ||
| 上清液 | 400 | 400 | - | - |
| 0.078μmol/mL标准液 | - | - | 400 | - |
| 试剂三 | 80 | 80 | 80 | 80 |
| 试剂四 | 60 | 60 | 60 | 60 |
| 蒸馏水 | 460 | 460 | 460 | 460 |
注意事项：
- 当测定吸光值大于0.7时，建议将上清液用蒸馏水进一步稀释后测量。计算时乘以稀释倍数。
- 离心后若上清液仍含有少量杂质，可将上清液再次10000g，常温离心10min去除。
- 称取两管0.1g土样，分别为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测定吸光值。计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.552-0.116=0.436，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.216-0.005=0.211，计算酶活得：
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文献和实验Research on the Promotion of Sludge Anaerobic Fermentation with Sodium Citrate under Low Concentrations of Polyaluminum Chloride点击查看
| AuthorPuli Zhu, Yilin Wang, Hui Bai, Jing Feng, Rui Zhang, Duo Bu, Zeng Dan, Wei Li, Xuebin Lu | Publish_toFermentation-Basel |
| IF3.7000 | PMID |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
酰胺酶的一种，是一种催化 L-β -谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨的反应的酶。 EC． 3． 5． 1． 2，在某些细菌、植物根中也含有此酶，但在高等动物中此酶的活性强。在动物肾脏和肝脏的酶，最适 pH为 8.0，在脑皮质和网膜的酶，最适 pH为 8— 9，在性质上有差异。取自大肠杆菌的酶， pH为 4.7— 5.1。此酶可受谷氨酸的阻抑，并且具有可被磷酸盐活化的和不活化的二种。在生物体内其从末梢组织转移来的谷氨酰胺生成的氨，具有调节体内碱贮（肾脏）和尿素的合成（肝脏）作用
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