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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
保存在-20℃,6个月。
- 保质期:
保存在-20℃,6个月。
- 英文名:
Mitochondrial Complex V/ATP Synthase Activity Assay Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC1440
- 规格:
25T/12S/50T/24S
| 规格: | 25T/12S | 产品价格: | ¥1800.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T/24S | 产品价格: | ¥2650.00 |
测定意义:线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成,也可逆过程水解ATP。此外,复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。
测定原理:复合体Ⅴ水解ATP 产生ADP 和Pi,通过测定Pi 增加速率来测定复合体Ⅴ活性。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
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文献和实验消耗速率(OCR)降低后,可进一步定位电子传递链的功能异常。 线粒体呼吸链由复合体 Ⅰ‑Ⅳ 以及 ATP 合酶(复合体 Ⅴ)共同组成,通过检测各复合体的酶活,能够明确具体是哪一个复合体发生功能损伤。 常用检测手段有两种:一是分离纯化线粒体后,采用比色法测定复合体酶活;二是通过免疫捕获技术,分别检测复合体 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ 的活性。 注意要点:若实验已经同时观察到 ATP 水平下降与 OCR 降低,此时补充呼吸链复合体活性检测,相比单纯增加 ROS 相关指标,更有利于把机制研究向上游推进。 图5丨电子
性起调节作用。很多凋亡的关键步骤包括caspase激活物的释放和电离子通道的改变,以及线粒体膜电位差的丢失等都发生于线粒体,因此线粒体 对凋亡的发生或抑制起重要作用。 (一)细胞色素C释放与凋亡复合体的形成 在研究哺乳细胞凋亡的生物化学反应时,发现某些位于线粒体内膜的蛋白可以直接启动细胞凋亡,并导致细胞色素C释放到细胞质或细胞核。被释放的细胞色素C可以和Apaf―1结合,改变其构象,大大增加后者与dATP/ATP的亲和性,并且使细胞色素C―Apaf―1形成多聚体。与此
下,进入线粒体中,丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA进入三羧酸循环,进而氧化生成CO2和H2O,同时NADH+H+等可经呼吸链传递,伴随氧化磷酸化过程生成H2O和ATP,下面主要将讨论有氧氧化在线粒体中进行的第二阶段代谢。 1.丙酮酸的氧化脱羧 催化氧化脱羧的酶是丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydrogenase system),此多酶复合体括丙酮酸脱羧酶,辅酶是TPP,二氢硫辛酸乙酰转移酶,辅酶是二氢硫辛酸和辅酶A,还有二氢硫辛酸脱氢酶,辅酶是FAD及存在于线粒体












