- ￥1650
- Solarbio
- 北京
- BC3245
- 2026年08月13日
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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Mitochondrial complex III / CoQ-cytochrome C reductase Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC3245-100T/48S
- 规格：
100管/48样
线粒体呼吸链复合体Ⅲ/CoQ-细胞色素C还原酶活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC3245
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体80 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体10mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体1.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 工作液的配制：临用前取1支试剂二转移到1瓶试剂一中混合溶解（约62T），用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融。
线粒体复合体Ⅲ（EC 1.10.2.2）又称CoQ-细胞色素C还原酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分，负责把还原型CoQ的氢传递给细胞色素C，生成还原型细胞色素C。
与氧化型细胞色素C不同，还原型细胞色素C在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能够反映线粒体复合体Ⅲ酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
实验中所需仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板（非聚苯乙烯材质）、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 尽量保持比色皿内反应液温度在37℃或25℃。可以在记录初始吸光度A1后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴中准确反应2分钟，之后迅速取出比色皿并擦干，记录2min时的吸光度。
- 当测定吸光值大于1时，建议将样本用提取液稀释后测定，计算公式中注意乘以稀释倍数。
- 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
- 由于提取液中含有一定浓度的蛋白（约1mg/mL），所以在测定样本蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量(单独测定)。
- 推荐使用样本蛋白浓度计算酶活，若用样本质量计算，则需加测胞浆提取物酶活，上清和沉淀酶活之和方为总酶活。
- 本试剂盒试剂足够完成100管反应。
- 附:使用样本重量计算公式：（样本检测数为100T/24S）
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol还原型细胞色素C定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅲ活力(U/g 质量)=[ΔA1×V反总÷（ε×d）×109]÷(W÷V提取×V样)÷T=262×ΔA1÷W
ΔA1：上清测定值；V反总：反应体系总体积，2×10-4L；ε：细胞色素C摩尔消光系数，1.91×104L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V提取：加入提取液体积，1.0mL；W：样本质量，g；T：反应时间，2min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
B、沉淀中复合体Ⅲ活力的计算:
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol还原型细胞色素C定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅲ活力(U/g 质量)=[ΔA2×V反总÷（ε×d）×109]÷(W÷V提取×V样)÷T=52×ΔA2÷W
ΔA2：沉淀测定值；V反总：反应体系总体积，2×10-4L；ε：细胞色素C摩尔消光系数，1.91×104L/mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V提取：加入提取液体积，0.2mL；W：样本质量，g；T：反应时间，2min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
C、样本复合体Ⅲ总活力的计算:
样本复合体Ⅲ总活力即为上清中复合体Ⅲ活力与沉淀中复合体Ⅲ活力之和。
复合体Ⅲ（U/g 质量）=262×ΔA1÷W +52×ΔA2÷W
D、以96孔板计算：
将上述公式中的d-1cm改为d-0.6cm进行计算即可。
实验实例：
- 取0.1g兔子肾脏进行样本处理，将复溶后的沉淀稀释2倍后按照测定步骤操作，使用微量玻璃比色皿测得计算ΔA=（A2测定-A1测定）-（A2对照-A1对照）=（0.9921-0.9077）-（0.9664-0.9419）=0.0599，按样本蛋白浓度计算得：
相关发表文献：
- Ming Song,Fangfang Chen,Yihui Li,et al. Trimetazidine restores the positive adaptation to exercise training by mitigating statin-induced skeletal muscle injury. Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle. November 2017;(IF10.754)
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- Wang M, Zhang Y, Xu M, et al. Roles of TRPA1 and TRPV1 in cigarette smoke-induced airway epithelial cell injury model[J]. Free Radical Biology and Medicine, 2019, 134: 229-238.
- Bao Z, Xu X, Chao H, et al. ERK/Nrf2/HO-1 pathway-mediated mitophagy alleviates traumatic brain injury-induced intestinal mucosa damage and epithelial barrier dysfunction[J]. 2017.
- Luo C, Long J, Liu J. An improved spectrophotometric method for a more specific and accurate assay of mitochondrial complex III activity[J]. Clinica Chimica Acta, 2008, 395(1-2): 38-41.
BC0510/BC0515 线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性检测试剂盒
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文献和实验指在生物体氧化还原中，参与电子传递的一系列氧化还原酶系，通常系指通过线粒体等的分子态氧氧化 NADH以及琥珀酸等的酶系。其电子传递顺序如下： O3 ←细胞色素（ a a3 ）复合体←细胞色素 c ←细胞色素 c1 但该顺序也表示每个前面物质的还原型将其后面物质的氧化型还原，这样反复进行，最终将分子态氧氧化成水。在呼吸链中有非血红素铁和铜原子等参与。在细胞内呼吸链系存在于线粒体的内膜上，各阶段的酶及因素可与不溶
当线粒体状态发生变化时，大家先想到的往往是ATP、膜电位和ROS，而深入开展机制研究时，还需要进一步考察线粒体呼吸功能、电子传递链活性、mtDNA拷贝数、线粒体形态动力学和线粒体自噬等多个维度。 开展实验设计时，可以先从三个层面选指标： 能量输出：OCR、ATP、呼吸链复合体活性 功能状态：膜电位、ROS、线粒体Ca²⁺ 数量与质量控制：mtDNA、线粒体形态、线粒体自噬 一般可以先用2～4个互补指标建立线粒体功能变化，再根据结果补充机制实验。 图1丨线粒体结构示意图
Nature 重磅：林圣彩院士团队七年攻坚！首次破解「神药」二甲双胍作用靶点之谜
）处于中心位置，其同时也作为机体代谢稳态的主要调控因子。目前，二甲双胍通过抑制线粒体电子传递链的复合物 I 而激活 AMPK 已被广泛接受。然而，在他们的研究中却发现能量水平的下降只存在小鼠服用高剂量二甲双胍的个体，也就是说，低剂量的二甲双胍不会引起线粒体呼吸链复合体 I 的抑制以及 AMP/ATP 比值的升高。 因此，有必要深入探讨临床相关剂量的二甲双胍是如何激活 AMPK 的。通过一系列的生化实验和观察，他们发现临床剂量的二甲双胍能充分抑制溶酶体的空泡 H+-ATPase（v-ATPase
