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文献和实验, 轻轻漂洗干净。 第三步:免疫荧光染色 视网膜置于3 g· L-1TritonX-100中4 ℃孵育1 h;从TritonX-100中取出后滴加山羊血清室温封闭抗原2 h, 吸去封闭液, 不洗。水浴箱孵育a-SMA单克隆抗体(1:100, 1 g· L-1TritonX-100稀释)37 ℃,3 h。滴少许抗荧光淬灭剂封片, 于荧光显微镜490 nm波长下观察。 操作要点 推挤出视网膜后,建议用眼科手术刀将视网膜切开而不推荐剪刀剪,因为眼科剪较厚,容易将视网膜挤压变形,当然熟练
灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好! 一、小鼠灌注 灌流固定小鼠时我一般采用输液器的针头(4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。 二、大鼠灌注 按大鼠体重,用 2% 戊巴比妥钠(0.25ml/100g)进行腹腔注射麻醉,开胸暴露心脏,向左心室内注射
技术原理与方法|将硅油物镜配合共聚焦激光扫描显微镜用于透明化标本的深层组织观察
1. 使用让标本透明的透明化技术进行深层组织观察 使用激光共聚焦显微镜对透明化标本进行深层组织观察时,物镜选择非常重要。观察这些样品时,奥伟登(Evident)硅油物镜系列具有出色的性能。以下,我们讨论了使用 FLUOVIEW 系列共聚焦激光扫描显微镜和硅油物镜对透明化标本的深层组织进行高分辨率观察的两个示例。 2. 使用 SCALEVIEW-A2 进行透明化小鼠大脑切片的深层组织观察 SCALEVIEW-A2 是奥伟登(Evident)用于让生物标本透明的产品。可消除光散射,且不会降低
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