SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)

特别提示：包括SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)
英文名称：SDS-PAGE Loading Buffer(non-Reducing，5×)
产品货号：WE0289
产品规格：5×2ml

  SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)是以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于非还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。

注意事项：
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、本品不含还原剂如巯基乙醇或DTT。
3、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×)与蛋白样品按照1：4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温，以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后，以取适量上清，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内。进行常规电泳。

储存条件：-20℃

除了SDS-PAGE上样缓冲液(非还原，5×),，我公司还供应以下相关产品：



名称：真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂
货号：BTN130529
规格：1mL
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液，溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时，抑制各种内源和外源蛋白酶活性，防止蛋白质降解。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天门冬氨酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容，在裂解液中加入1/100体积即可。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

名称：免疫组化用苏木素染色液
货号：SNM471
规格：50ml

名称：5% BSA封闭液
货号：SNM484
规格：100ml

名称：彩色预染宽分子量蛋白Marker(10～260kD)
货号：RFT150
规格：20T(100μl)
本蛋白包含10种纯化的预染蛋白质组成，分子量范围为10kD-260kD，含有四种不同颜色，可以用于SDS-PAGE和Western Blot转膜时确定未知蛋白的分子量。



使用方法：
1、第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
2、-20℃取一管样品，彻底融化，上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
3、电泳结束后，可以直接在胶上观察结果。
4、预染蛋白Marker在不同的凝胶系统中迁移率会有不同，因此只能用来粗略估计目的蛋白的大小。如要精确确定蛋白的大小，请在同一凝胶系统中用非预染蛋白Marker来标定预染蛋白Marker的分子量。

储存条件：-20℃。

名称：牛凝血酶(高活力，>2000 IU/mg)
货号：SY0384
规格：1 KU
凝血酶是由大小分别为31KD和6KD的两条肽链通过二硫键组成的一种丝氨酸蛋白水解酶，可从动物血浆中利用已激活凝血酶原水解制得，可催化纤维蛋白原（fibrinogen）水解释放A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合，在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块，常用于诊断学中凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化等；另外，由于凝血酶切割序列专一，水解效率高，因此在分子生物学、生物化学或生物工程制药研究中也常作为工具酶用于重组融合蛋白（包含凝血酶识别位点）的特异性断裂。

本品是从牛的血浆纯化制得，具有纯度高、比活高、不含有其他蛋白酶活性、灭活病毒、生产稳定性好等特点。该酶最适切割位点：A-B-Pro-Arg-▼-X-Y （其中，A和B为疏水氨基酸，X和Y为非酸性氨基酸），常见的识别序列为：1. Leu-Val-Pro-Arg-▼-Gly-Ser。2. Gly-Arg-▼-Gly。

英文别名：Coagulation factor II
CAS：9002-04-4
分子量：37KD
比活度：＞2000 IU/mg protein
外观：冻干粉末
纯度：SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带
湿度： ≤5% w/w

使用方法（切割体系）
本品有效切割质量比1:2000，通常在未做过预实验的情况下建议在1:1000质量比进行体系的优化，即1mg的目的蛋白加入2U的酶（2000U/mg），使用时可用生理盐水将酶配成100U/ml ，有效消化缓冲液：20mM Tris-HCl，含150mM NaCl，pH8.0。在20℃-37℃切割0.3-16h。
【注】：
① 具体反应温度可根据融合蛋白的性质而定，如需要低温保存的蛋白，可在4℃切割24h。
② 因为凝血酶会吸附在玻璃上，建议用塑料管分装冻存（-20℃）凝血酶溶液。

储存条件：4℃，有效期36个月。

名称：膜封闭液(Western Blot)
货号：QN1120
规格：100mL|500mL
Western Blot膜封闭液适用于 Western Blot实验中PVDF膜或NC膜等转印膜的封闭。封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比，以达到理想的显色效果。 按照每张膜封闭需要5～10毫升封闭液计算，一个包装的Western封闭液可以封闭 10～20张膜。

使用方法：本产品为即用型，无需稀释。蛋白转膜后将转印膜置于容器中，加入足够量的膜封闭液充分覆盖膜，室 温下振荡封闭半小时至 1 小时，即完成膜的封闭，然后进行一抗孵育等后续操作。

注意事项：通常在室温封闭 60 分钟即可。对于一些背景非常高的抗体，可以 4℃封闭过夜。

储存条件：2～8℃，有效期一个月

名称：昆虫胞浆蛋白提取试剂盒
货号：HR8076
规格：50T/100T

名称：细胞裂解液
货号：HR0271
规格：50ml/100ml
储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2．整个过程须保持样品处于低温状态。

使用方法：
根据样本数量，每500μl裂解液中加入2μl蛋白酶抑制剂。
A．细胞裂解
1．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl 非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75 cm2培养瓶加1～2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
4.在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
3．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。