免疫共沉淀Co-IP技术服务-coip高分文章案例多-价格低

免疫共沉淀CoIP技术原理

细胞裂解后，孵育结合了抗体的珠子，诱饵蛋白通过其抗体结合到Beads上，同时诱饵蛋白的互作蛋白，也一起“共沉淀”到Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后，再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来，便得到免疫共沉淀CoIP产物。CoIP产物既可用Western Blot检测已知蛋白，也可用质谱鉴定未知蛋白。

当没有合适的诱饵蛋白抗体时，可以通过表达融合了Flag标签的诱饵蛋白，利用Flag标签做免疫沉淀。即细胞过表达Flag-Bait，经裂解后与anti-Flag珠子孵育，诱饵融合蛋白与Beads结合，其互作蛋白“共沉淀”到Beads上，再经洗涤、洗脱后用WB或质谱检测。

Co-IP实验流程-辉骏生物

带标签免疫共沉淀CoIP实验流程：

免疫共沉淀CoIP技术应用

筛选或验证内源性的互作蛋白。

几种蛋白互作技术特点

1. GST pull down：体外表达诱饵蛋白，简单易行，适合无IP级别抗体、又不易转基因的情况；
2. AP-MS：体内表达带标签的诱饵蛋白，洗脱产物无抗体污染，适合无IP级别抗体、但易转基因的情况；
3. TAP-MS：体内表达带双标签的诱饵蛋白，两次纯化，非特异结合蛋白更少，适合无IP级别抗体、但易转基因的情况；
4. CoIP：基本是天然蛋白复合物分离，能比较好的反应体内真实的蛋白互作情况，适合于有非常好的IP级别抗体的情况；
5. SILAC-IP：可定量鉴定分析体内蛋白复合物，适合于可传代细胞，尤其是易转基因细胞。

coip免疫共沉淀服务*辉骏优势

1. 近十年服务经验，服务客户众多，案例发表在Nature Cell Biology、Nature Plants、Cancer Research等知名期刊上；
2. 对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻，擅长针对客户具体情况提出合适的方案建议；
3. 自有分子及细胞生物实验平台，能有效制定并执行优质实验路线；
4. 自有蛋白质组学平台，对微量CoIP实验产物的质谱鉴定有十足的把控能力，对后续的生物信息分析有独到的见解；
5. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章，确保客户安心免疫共沉淀下游实验及投稿。


co-ip技术服务信息-辉骏生物

项目名称	客户提供	结果交付	实验周期
Co-IP	实验样本 诱饵蛋白的IP级抗体 待测蛋白抗体 实验信息表	1、诱饵蛋白WB检测图 2、待测蛋白WB检测图 3、结果整理图 4、实验报告	3-4周
Co-IP MS	实验样本 诱饵蛋白的IP级抗体 实验信息表	1、诱饵蛋白WB检测图 2、质谱检测结果 3、生物信息学分析结果 4、实验报告	6-7周

免疫共沉淀CoIP实验—辉骏生物客户文献

1. Li H.B. et al: The plant ESCRT component FREE1 shuttles to the nucleus to attenuate abscisic acid signaling. Nature Plants. 2019，IF=13.256. 【研究内容】：客户发现，作为内体蛋白分选转运复合体成分之一的FREE1基因，受到脱落酸刺激时候会发生磷酸化并移位到细胞核。客户利用酵母双杂交技术找到两个核蛋白ABF4 and ABI5会与FREE1结合，免疫共沉淀CoIP实验进一步证实了FREE与这两个蛋白的互作。后续实验表明，FREE1通过抑制ABF4、ABI5对下游基因的调控能力，参与了脱落酸信号通路。 使用相关技术：蛋白质谱鉴定、免疫共沉淀CoIP、Co-IP MS实验

2. Huang C.Y. et al: UBAP2L arginine methylation by PRMT1 modulates stress granule assembly. Cell Death Differ. 2020 , IF=10.717. 【研究内容】：前期研究表明UBAP2L蛋白参与应激颗粒形成。客户在这项研究中，用免疫共沉淀结合质谱等技术，发现PRMT1甲基化UBAP2L，UBAP2L蛋白并且和另外三个应激颗粒形成有关的重要蛋白有相互作用。这些蛋白复合物介导了应激颗粒的形成。 使用相关技术：CoIP技术服务、质谱鉴定、lc-ms/ms 修饰位点鉴定

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