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- 文献和实验
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一年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
100ml
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文献和实验的 SDS-PAGE 的相关知识。(PS:附带一张简单明了的 DNA 印迹、RNA 印迹及蛋白质印迹流程图~~)一、配胶、制胶首先 SDS(十二烷基硫酸钠,一种阴离子洗涤剂)能使蛋白变性,并使所有蛋白质颗粒表面覆盖一层 SDS→使蛋白均匀地带上负电荷→从而使质量相似但形状或电荷不同的蛋白在电泳液中能以相似的速度进行迁移→→因此 SDS 被加到凝胶溶液、蛋白样品和电泳液中,以确保蛋白在整个过程都展开并保持负电荷。其实所谓的凝胶,其本质是聚丙烯酰胺。过程中,多格聚丙烯酰胺分子相互交联,最后形成一个蛋白
at room temperature. Dithiothreitol should then be added, just before the buffer is used, from a 1 M stock 2. Tris-Glycine electrophoresis buffer-1000 ml 25 mM Tris base 250 mM glycine pH 8.3 0.1% SDS A 5X stock
% ammonium persulfate=0.1 g in 1 ml waterE. 10% SDS3% Stacking layer: 6.3 ml water/2.5 ml soln C/0.1 ml 10% SDS/1.2 ml soln A/10 µl TEMED/100 µl persulfate5X Tray Buffer/liter: 15 g Tris/72 g glycine/5 g SDS. Dilute 1:5 for upper tray and 1:10 for lower tray
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