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- 英文名:
Proteinase K, recombinant, PCR Grade
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嵘崴达
- 规格:
5 ML
蛋白酶K,重组,PCR级
Solution from Pichia pastoris
别名:
Endopeptidase K, pro-k, Proteinase K
一般描述
重组酶与最初从白色念球菌(Tritirachium album)中分离出来的天然蛋白酶相同。重组酶的规格与天然蛋白酶的规格相同。氨基酸序列(分子量)和分子结构相同。但是,重组酶比天然酶的纯度更高,因为根据当前质量控制程序,重组酶不含DNA,因此它非常适用于分离PCR和RT-PCR模板。
蛋白酶K是枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,无明显的切割特异性。
该酶还具有冻干形式。
应用
- 这款PCR级蛋白酶K对天然蛋白质非常有效,因此,可快速灭活内源核酸酶,如RNA酶和DNA酶。这种特性使蛋白酶K特别适用于从组织或细胞中分离天然RNA和DNA。
- 该酶通过激活细菌自溶因子而促进细胞裂解。
- 该酶通过修饰细胞表面的蛋白质和糖蛋白来分析膜结构。
- 该酶特别适用于分离核酸以用于扩增反应。
- 蛋白酶K可在菌落转移准备过程中用于去除细胞碎片,以及用于处理组织切片以确保在原位杂交过程中实现有效的探针浸润。
特点和优势
蛋白酶K能够切割氨基酸X和Y(X-↓-Y)之间的蛋白质,其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸,Y = 任何氨基酸。该酶对天然蛋白质非常有效,因此,可快速灭活内源核酸酶,如RNA酶和DNA酶。
- 选择一种有效的模板制备工具。可灭活大多数物种的DNA酶和RNA酶。
- 注重一致的质量和性能。严格的质量测试确保了最佳的稳定性和高水平的批次间性能一致性。
- 适用于各种条件下的样品制备。这款强大的酶可在很广的pH范围内保持稳定,是各种应用的理想选择。
- 受益于无污染的酶。该酶经过测试,不含RNA酶和DNA酶,并且几乎不含DNA。它特别适用于PCR模板的分离。
质量
根据当前的质量控制程序,该制剂不含RNA酶、DNA酶和DNA。
不含核酸酶:每一批次均在各种底物上经过测试,确保不含核酸内切酶、核酸外切酶、核糖核酸酶和开口活性。
DNA含量:≤10pg/mg酶(由Threshold测定)
生物负载:≤5cfu/g(由《欧洲药典》中最严格的测试确定,该测试能确定活的需氧菌、酵母和真菌的总数)
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Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
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文献和实验products. Nearly all routine methods are suitable for template DNA purification. Although even trace amounts of agents used in DNA purification procedures (phenol, EDTA, Proteinase K, etc.) strongly inhibit Taq DNA Polymerase, ethanol precipitation of DNA
一、样品处理DNA是染色体的主要组成部分,是PCR的扩增模板。要进行PCR,研究DNA结构与功能或者用于诊断目的,首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色体DNA平均大小为3.0×109bp),提取DNA应尽量保持DNA完整性和纯度,即在提取中尽量避免机械张力引起的DNA分子降解,又要注意杂质及蛋白的去除,防止胞内酶解DNA。因此,提取DNA的基本过程是:用Proteinase K及SDS,在EDTA存在下,裂解细胞,消化蛋白质,使核蛋白解聚及胞内DNA
【精华】vol 687 Chapter 5 PCR引物与PCR引物设计
Preparation 1. DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen) (see Note 1). 2. Cells or tissue from which DNA will be extracted. 3. Proteinase K digestion: 50 ug/ml Proteinase K in 100 ug/mlin 0.01 M Tris–HCl, pH 7.8, 5 mM EDTA, 0.5% SDS. 4. Saturated
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