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- 2025年07月16日
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文献和实验songling8205 本人正在做蛋白检测，想知道冻存在-80度冰箱里的标本，在进行蛋白提取前用什么方法解冻，有利于减少蛋白丢失，尽可能减少对实验的影响，谢谢相关人士指导！！ 急求！！！！ fangweibin119 把样品放在冰上 songling8205 我通常是放在4度冰箱让它缓慢融化的，可是这样造成分离的单个核细胞呈团块状沉积于1.5ML的EP管中
【讨论】血清中的Galectin-3 检测方法,能用Westernblot吗?
pengmin8866 各位前辈! 我是新手,刚做关于Galectin-3 的实验,要测定血清中的量,不知道用什么方法好.请帮我找找血清中的Galectin-3 的论文及方法啊!万分感激! freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18319555 http://d.wanfangdata.com.cn/NSTLQK_NSTL_QK17971240.aspx
Westernblot基本流程 1.蛋白处理：此步骤是关键，蛋白处理的好否决定结果好坏。取细胞，3000rpm 3min离心，加入含蛋白酶抑制剂（现做现加）的细胞裂解液(本实验室选择RIPA，1×106/L细胞对应100ul)，枪尖反复吹吸裂解细胞（此步非常重要，容易出现鼻涕样的液体，此为裂解不充分的缘故，所以应反复吹打或者置于振荡器上，直至鼻涕状液体消失）。冰上放置至少半小时。 2.煮蛋白：12000rpm，15min离心，吸取上清，加入Loading buffer后于沸水中煮5min
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