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流式细胞仪检测技术服务
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伊莱博生物科技(上海)有限公司
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
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文献和实验细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是caspase家族激活,磷脂酰丝氨酸外翻,这时细胞的形态已经发生了改变,可以看到细胞变小,胞核皱缩;最后是细胞内DNA断裂,形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中,都有相应的流式细胞仪的检测方法,可以采用
。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清。 5.细胞悬液中加入500 μL JC-1染色工作液重悬细胞。37°C,5%CO2培养箱中孵育15-20 min。 注:培养温度与细胞类型有关,一般哺乳动物细胞建议37°C,其他种属根据细胞培养条件选择合适的温度。 6.300 g离心5 min,弃上清,加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer洗涤2次。 7.加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer重悬细胞。 8.样本置于冰上保存,30 min内用流式细胞仪检测。 三
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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