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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
386
- 英文名:
One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50μl×50次|50μl×100次
特别提示:包括一步法耐热RT-PCR试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法耐热RT-PCR试剂盒
英文名称:One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
产品货号:ALH272
产品规格:50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的,使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录,大大提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率,产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
试剂盒组分(50次):
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml
适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段,所需zuì佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。
储存条件:-20℃,有效期半年。
本制品别名:耐热一步法反转录PCR试剂盒
除了一步法耐热RT-PCR试剂盒,耐热一步法反转录PCR试剂盒,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分?
各位老师: 您们好!偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因,并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A),得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物(GSP)起始。 在实际应用中,RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步法
中,逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后通过 PCR 反应扩增 cDNA,为下游实验提供研究模板,因而逆转录酶是实验成功的关键步骤之一(如下图)。选定的逆转录酶应对所有样本均具有最高效率,即便是难转录 RNA 样本,如降解、抑制剂残留或具有高度二级结构的 RNA 样本。 图. 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。RT =逆转录,RTase =逆转录酶 常用的 RT-PCR 方法分为一步法和两步法,每种方法都各有优缺点,简要概述如下: 表. 对比一步法和两步法 RT-PCR 定量 RT-PCR
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