TOP10感受态细胞

特别提示：包括TOP10感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TOP10感受态细胞
英文名称：TOP10 Competent Cell
产品货号：WE0251
产品规格：100μl×10支

  本产品是大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。TOP10是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。

产品组成：

组份	0.1ml×10支
TOP10 Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。

除了TOP10感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
BTN130560	大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN140431	大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN60302	硫酸卡那霉素干粉	1g
YT454	Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)	1μg
ALH328	Gateway entry clone构建试剂盒	20次
ALH338	无缝连接克隆试剂盒	10次
ALH355	一管式定点突变试剂盒	10次|20次
ALH424	强效EB去除剂	50次|100次
RFT118	λ噬菌体DNA	100μg
SY0275	X-Gal	1g
SY0286	多片段一步法快速克隆试剂盒	10T
JN0106	2×pEC-T vector快速连接预混液	20次
QN1031	α-半乳糖苷酶显色底物	10mg|100mg
MQ0011	Stbl2化学感受态细胞	10×100μl/50×100μl
MQ0016	SURE化学感受态细胞	10×100μl/50×100μl
MQ0054	EHA105农杆菌感受态细胞	10×100μl/50×100μl
MQ0066	Y187酵母感受态细胞	10×100μl/50×100μl
GL1187	氯化钙细菌感受态制备液	100ml
GL1191	转化储存液(2×TSS,pH6.5)	100ml
QN2143	JM109受体菌	1ml