- ¥790
- 钦诚生物
- QC111008
- 上海
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
室温
- 规格：
50次
（Polysaccharide，PS）污染，这些污染会严重影响下游的酶切和PCR等实
验。为此北京天恩泽开发了非酶法多糖清除剂（DNA专用），它具有下列特点：
1. 高效，能有效地去除基因组DNA中的多糖污染,使DNA溶液不再粘稠。
2. DNA分子完整性不会受到任何影响。
产品及特点
3. 快速，全部操作在样品管中完成，只需要二十多分钟。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和保存。
使用方法
1.如果DNA溶液的体积不够100 uL，用水或TE补到100 uL。如果超过100
uL，可以用天恩泽的核酸浓缩液（需另买）浓缩到100 uL，或者分成几
个100 uL再处理。
2. 将50 uL溶液A加入到100 uL待处理的DNA样品中，充分吹打混匀。
3. 15 uL的溶液B，充分吹打混匀。如果溶液B过于粘稠，可以先在65℃保
温后再取用。
4. 加入150 uL的氯仿，充分振荡半分钟。
5. 12000-15000 g离心2分钟，小心转移上清到一新的1.5 mL塑料离心管
中，交界处将有白膜样的多糖沉淀。
6. 重复上步操作，白膜样的多糖沉淀将减少。是否需要继续此步操作根据
多糖污染严重程度决定。可以一直重复直到白膜不再出现。本产品提供
的溶液B的量足够抽提5-6次。
7. 在最后得到的上清液中加入两倍体积（200 uL）的微量核酸沉淀剂，混
匀后12000-15000 g离心10-20分钟，小心弃上清。注意不要触及DNA
沉淀。
8. 加入1 mL自备的 75%乙醇, 振荡器上短暂振荡数秒后12000-15000
g离心2分钟，小心弃上清。注意不要触及DNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，用移液枪小心吸去残留液体（约50 uL）后，加入适量
自备TE，立即电泳检测，OD检测后放-80℃长期保存。
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文献和实验。DNA 的一级结构不稳定，会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶，如果核酸酶处理不干净，残留在纯化的核酸样本中，从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶，在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用，很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
: (1) 引物 检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解（建议用新合成的引物进行尝试）；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物（如果之前用过该引物，可排除引物设计问题）。 (2) 模板 长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的 DNA 双链作为模板；模板 GC 含量过高会导致 DNA 的双链无法打开，此时加入 PCR Enhancer，可以有效降低解链温度；模板为粗品，有可能是 DNA 未释放出来（若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩
) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
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