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柱式海洋动物DNAout

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  • ¥590
  • 钦诚生物
  • QC130401
  • 上海
  • 2025年07月15日
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      一年

    • 供应商

      钦诚生物

    • 保存条件

      室温

    • 规格

      50次

    本产品是在柱式动物 DNAout试剂盒基础上优化 改良而得,专门针对海洋动物的基因组 DNA 提取的试剂盒,可用于鱼类、虾 类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组 DNA 提取,可以有效去除海 洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。 本产品主要特点是:
    1. 使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可适用于各种常规分子生物学操作,如: 酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等试验。
    2. 操作简单安全,1 小时内即可获得超纯的基因组 DNA,纯化过程中不需 要使用氯仿等有机试剂。
    3. 应用广泛,适用于多种动物细胞和动物组织等。
    4. 性价比高,质量和国外同类试剂盒相当,价格更低。

    使用方法 使用前请先在溶液 C 和通用洗柱液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶 上的标签。
    1. 切取不多于 30 mg 的组织材料,放入装有 200 μL 溶液 A 的离心管中, 涡旋振荡 15 秒。注意:根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的 细胞量较大,一般建议提取量不超过 20 mg。如果需要去除 RNA,可加 入 40 μL RNase A(10 mg/mL)溶液, 振荡 15 秒,室温放置 5 分钟。
    2. 加入 20 μL 蛋白酶 K 溶液(20 mg/mL),涡旋混匀,简短离心以去除管 盖内壁的水珠。在 56℃下放置,直至组织完全溶解,简短离心以去除管 盖内壁的水珠,再进行下一步骤。注意:不同组织裂解时间不同,通常需 0.5-2 小时即可完成。扇贝组织 0.5 小时基本可裂解完全,虾和鱼类组 织 1 小时。每小时振荡混合样品 2-3 次,每次振荡混匀 15 秒。
    3. 加入 200 μL 溶液 B,充分颠倒混匀,70℃放置 10 分钟,溶液应变清亮, 简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意:加入溶液 B 时可能会产生白色 沉淀,一般 70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮, 说明细胞裂解不彻底,可能导致提取 DNA 量少和提取出的 DNA 不纯。
    4. 加入 200 μL 无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短 离心以去除管盖内壁的水珠。
    5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集 管中),12,000 rpm(~13,400×g)离心 30 秒,倒掉废液,将吸附 柱放回收集管中。
    6. 向离心吸附柱中加入 500 μL 溶液 C(使用前请先检查是否已加入无水乙 醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心 30 秒,倒掉废液,将吸附柱放 入收集管中。 7. 向吸附柱中加入 600 μL 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水 乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心 30 秒,倒掉废液,将吸附 柱放入收集管中。 8. 重复操作步骤 7。
    9. 将吸附柱放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 分钟,倒 掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂 洗液。注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙 醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等)实验。
    10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加 50-200 μL 通用洗脱液,室温放置 2-5 分钟,12,000 rpm(~13,400 ×g)离心 2 分钟,将溶液收集到离心管中。注意:通用洗脱液的体积不 应少于 50 μL,体积过小影响回收效率。为增加基因组 DNA 的得率,可 将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室温放置 2 分钟,12,000 rpm (~13,400×g)离心 2 分钟。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。 若用超纯水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;且 DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解。

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        从不同角度研究和阐明生活在海洋环境中的海洋动物的生存和发展规律的学科。主要的研究内容有:海洋动物的形态结构、系统分类、区系分布、胚胎发育、演化、经济价值和生命活动过程中所表现的各种生理功能、行为习性、以及它们与海洋环境之间的相互关系等。根据海洋动物学研究对象的不同,可分为海洋无脊椎动物学和海洋脊椎动物学。还可根据不同动物类群而分为海洋原生动物学、海洋贝类学、海洋鱼类学、海洋兽类学等。也可根据研究课题的性质分为海洋动物的形态学、分类学、胚胎学、生理学、遗传学、生态学等分支学科

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    • 如何做好 WB 方案设计?你需要了解这些信息

      在 RIPA 不可溶组分中,如果样品又是研磨困难的组织样品,则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上(内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,内体等)表达,且蛋白表达量较低,若用总蛋白检测时条带较弱,则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测,提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程,推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离,将样品分离为不同组分如分成细胞核,细胞浆,细胞

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