- ¥290
- 钦诚生物
- QC70804
- 上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
室温
- 规格：
50次
本产品是在天泽基因一步式质粒 DNAOUT（CAT#70301）基础上开发的、
能够从单个菌落快速提取质粒 DNA 的产品。它之所以能够从单个菌落中提取到
可以用常规电泳方法检测得到的质粒 DNA 是由于一步式细菌裂解技术能够使
细菌释放出其几乎所有的质粒 DNA。本产品具有下列特点：
1. 不需过夜培养细菌就可以提取质粒 DNA，能为研究人员节约一天的宝贵时
间。
产品及特点
2. 快速，整个过程只需要不到十分钟（对一个样品而言）。
3. 一步式裂解细菌，不使用强碱溶液，对 DNA 损伤小。
4. 得到的质粒 DNA 足够 1-2 次电泳或酶切实验，足够多次 PCR、测序和细
菌转化实验。
5. 适用于高拷贝、中拷贝和低拷贝的质粒。
使用方法 1.用吸头挑取一个直径在 2 mm 以上的菌落到 100 uL 一步法单菌落质粒
DNAout 溶液 A 中（溶液 A 用前摇匀），充分吹打或振荡裂解直到裂解液
变澄清。
2. 直接将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置 2 分钟使质粒 DNA 与
膜结合。室温 12000-15000 g 离心半分钟，弃穿透液。
3. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用预洗液，室温 12000-15000 g 离心
半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前
需要加热到 60℃左右使之融化，混匀后再用。
4. 再在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用预洗液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则 DNA 纯度不高。
5. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离心
半分钟，弃穿透液。
6. 再在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
7. 再在离心吸附柱中加入 0.4 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质
粒 DNA 的 OD260 和 280 的比值达不到 1.8。
8. 室温 12000-15000 g 离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，
否则残留乙醇会影响后续的电泳上样（DNA 沉不到加样孔里去）和酶反应。
9. 将离心柱置于一个新的 1.5 mL 自备塑料离心管中，加入 30-100 uL DNA
洗脱液 2.0，室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 预热到 65-80℃，
则效果更好。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟，离心管底部溶液即为质粒 DNA，可以
直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
能够从单个菌落快速提取质粒 DNA 的产品。它之所以能够从单个菌落中提取到
可以用常规电泳方法检测得到的质粒 DNA 是由于一步式细菌裂解技术能够使
细菌释放出其几乎所有的质粒 DNA。本产品具有下列特点：
1. 不需过夜培养细菌就可以提取质粒 DNA，能为研究人员节约一天的宝贵时
间。
产品及特点
2. 快速，整个过程只需要不到十分钟（对一个样品而言）。
3. 一步式裂解细菌，不使用强碱溶液，对 DNA 损伤小。
4. 得到的质粒 DNA 足够 1-2 次电泳或酶切实验，足够多次 PCR、测序和细
菌转化实验。
5. 适用于高拷贝、中拷贝和低拷贝的质粒。
使用方法 1.用吸头挑取一个直径在 2 mm 以上的菌落到 100 uL 一步法单菌落质粒
DNAout 溶液 A 中（溶液 A 用前摇匀），充分吹打或振荡裂解直到裂解液
变澄清。
2. 直接将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置 2 分钟使质粒 DNA 与
膜结合。室温 12000-15000 g 离心半分钟，弃穿透液。
3. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用预洗液，室温 12000-15000 g 离心
半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前
需要加热到 60℃左右使之融化，混匀后再用。
4. 再在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用预洗液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则 DNA 纯度不高。
5. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离心
半分钟，弃穿透液。
6. 再在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
7. 再在离心吸附柱中加入 0.4 mL 的通用洗柱液，室温 12000-15000 g 离
心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质
粒 DNA 的 OD260 和 280 的比值达不到 1.8。
8. 室温 12000-15000 g 离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，
否则残留乙醇会影响后续的电泳上样（DNA 沉不到加样孔里去）和酶反应。
9. 将离心柱置于一个新的 1.5 mL 自备塑料离心管中，加入 30-100 uL DNA
洗脱液 2.0，室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 预热到 65-80℃，
则效果更好。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟，离心管底部溶液即为质粒 DNA，可以
直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
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