- ¥490
- 钦诚生物
- QC71206
- 上海
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
室温
- 规格：
50次
1. DNA 更加纯净，大多数 DNA 样品的 OD260/280 值在 1.8-1.9 之间。
2. DNA 产率一般在 200ug/g 左右(跟组织种类密切相关)。
3. 可直接用于 PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单，离心吸附操作代替离心沉淀，整个过程室温操作约 10 分钟， 适合大规模样品处理。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高，质量和国外同类产品相当，但价格更便宜。
运输及保存 常温运输和保存、有效期一年。
使用方法 注意：溶液 A 容易产生沉淀，溶液 B 十分粘稠，用前均需要在 65℃水浴中加热使 沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。
1. 根据使用材料的不同进行下列操作： a) 对贴壁细胞：吸尽培养液，在每 10 平方厘米细胞中加入 0.8 mL 预热的溶液 A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解，然后把裂解液转移到 1.5 mL 塑料离 心管中。 b) 对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每 1-5×106悬浮细胞中加入 0.8 mL 预热的溶液 A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。如果是 fibroblasts 或 carcinoma 细胞，0.8 mL 溶液 A 的细胞使用量不要超过 1×106 个细胞。 c) 对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入 10 mL 或 15 mL 塑料离心管中，每 50-100 mg 组织加 0.8 mL 预热的溶液 A， 用剪切式匀浆器匀浆 30 秒左右，然后把裂解液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。 对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织（细胞中含大量正在复制的 DNA）， 建议组织的使用量不要超过 50 mg。 d) 对 DNALOCKER 保存组织：先用纸吸去 DNALOCKER 液体后再剪切成小块，其余 操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2. 加入 0.4 mL 预热的溶液 B 到裂解液中。由于溶液 B 十分粘稠，可将 1mL 枪 头剪掉一截再用，也可以用称量方法加 0.4 g。加入溶液 B 后需要颠倒数次充 分混匀。
3. 65℃水浴 5-10 分钟。如果室温放置，DNA 产量将降低 10-20%。
4. 加入 0.2 mL 自备氯仿，振荡器上充分振荡混均 30 秒，此时溶液将呈乳白色。 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5. 12000-15000 g 室温离心 2 分钟。上清透明，中间层为白膜（蛋白层）。
6. 小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
7. 每个管中加入 1.5 倍体积的溶液 C，充分颠倒混匀。
8. 分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟， 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心 吸附柱中，室温放置 2 分钟，12000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液）。
9. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000 g 室温离心半分钟， 弃穿透液。
10. 加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000 g 室温离心半分钟， 弃穿透液。
11. 12000-15000 g 室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液 会污染 DNA。
12. 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。 13. 将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 50-100 uL DNA 洗 脱液 2.0，室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。 14. 12000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 DNA 样品，可以立即 使用或存放于冰箱待用。
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文献和实验在 RIPA 不可溶组分中，如果样品又是研磨困难的组织样品，则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上（内质网，高尔基体，溶酶体，线粒体，内体等）表达，且蛋白表达量较低，若用总蛋白检测时条带较弱，则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测，提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程，推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离，将样品分离为不同组分如分成细胞核，细胞浆，细胞
2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒：MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒： MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout（动物DNA提取试剂盒）：3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout（植物DNA提取试剂盒）：3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒)： 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒： 3673-10 10 次 90元
稳定。蛋白质的沉淀效率在 4C会更好一些。 介质纯化方法，是一个越来越受到重视的方法。其最大特点是非常适合大规模核酸抽提，并且因为受人为操作因素影响小，纯度的稳定性很高 (虽然纯度不一定比PC纯化方法更高)。其致命弱点是样品过量。介质可以分为两大类，一类是柱式的，即介质被预先装填在下面是通的柱子里；另外一类则是颗粒状(如Glassmilk、磁性小珠等)。颗粒状的介质的纯化操作与经典的醇沉淀差别不大，都是通过数次的加液-倒液过程，干燥后，溶解即可获得纯化好的核酸。柱式纯化的操作虽然也是有加液-倒液
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