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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 供应商:
钦诚生物
- 保存条件:
室温
- 规格:
50次
1. 操作更加简单快速,一个样品只需要十多分钟的时间。
2. DNA 更加纯净,OD260/280 一般都在 1.8 以上,得到的 DNA 样品原液或稀 释液可以直接用于 PCR 扩增。
3. 每次微量提取可以处理 100-300mg 左右的样品,能得到 5 ug 左右 DNA,片 段长度在 30 Kb 左右。
4. 可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的 DNA。
5. 试剂无毒无害, 环保。
使用方法
1. 65℃预热溶液 A,待其沉淀溶化后充分混匀,取 0.5 mL 加入到 1.5 mL 塑料 离心管中并放置于 65℃待用。
2. 称取 0.1-0.3 g 的粪便,加入到含预热溶液 A 的离心管中,震荡器上剧烈震荡 5-10 分钟。如果是扩量操作,可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一 种粪便在较大离心管中震荡处理,然后再分到 1.5 mL 离心管中。注意:不论使 用大的还是小的离心管,一定要让管底的粪便震荡起来。
3. 将离心管置于 65℃水浴中保温至少 5 分钟。
4. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈 淡黄色或深棕色,实际颜色随样品而异,上清液的体积一般为 300-400 µL)。
5. 在上清液中加入等体积的溶液 B,上下颠倒 30 秒充分混匀,溶液将呈白色或 淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少 5 分钟。
7. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,转移上清到新的 1.5 mL 离心管中,上清 液颜色将比第 4 步得到的上清的颜色稍淡,体积在 0.7 mL 左右。 注意:下面第 8-第 9 步的氯仿抽提操作可以省略,直接进入第 10 步,但 DNA 的 产量会低 50%左右,OD260/280 在 1.7-1.8。如果直接进入第 10 步,则转移的 溶液体积不要超过 0.6 mL,否则没有空间加溶液 C。
8. 加入 0.2 mL 的氯仿(自备),震荡器上充分振荡 30 秒混匀。注意:一定要让管底 的溶液震荡起来。
9. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,小心转移上清到新离心管中。说明:离心 后两相交界面将有白色膜状物,其中有机相部分颜色较深,一般呈淡棕色。将 0.5 mL 上清转移到新的 1.5 mL 离心管中。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入 0.8 mL 的溶液 C,上下颠倒 30 秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温 离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液)。
12. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃 穿透液。
13. 如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的 DNA 的纯度稍有 提高,但产量稍微有所降低。
14. 12000-15000 g 室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液 会污染 DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 50-100 uL DNA 洗 脱液 2.0。
16. 室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。
17. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 DNA 样品,可以立即使 用或存放于冰箱待用。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
,手工清扫粪便困难,适于机械清粪兔场应用。 4.活动式兔笼 般由竹木或镀锌冷拔钢丝等轻体材料制成,根据构造特点可分为单层活动式、双联单层活动式、单层重叠式、双联重叠式和室外单间移动式等多种。主要优点是移动方便,构造简单,易保持兔笼清洁和控制疾病等。缺点是饲养规模较小,仅适用于家庭小规模饲养。 5.立柱式兔笼 这类兔笼由长臂立柱架和兔笼组装而成,一般为3层,所有兔笼都置于双向立柱架的长臂上。主要优点是同一层兔笼的承粪板全部相连,中间无任何阻隔,便于清扫。缺点
高通量、低成本SNP、突变或甲基化检测方法—HRM 技术应用
的乙醇立刻固定,保证酒精的体积是标本的5 倍左右。 • 石蜡包埋组织切片:要求提供10 张组织切片(面积>10 mm×10 mm ,厚度约5 -10μm),载玻片片盒保存、常温运输。如果组织太小,请酌情增加送检样品数量。 • 血液样本:取5ml 抗凝血,获得血浆,常规冰袋4℃低温运输。 • 胸腹水:肿瘤胸腹水离心后加75% 的酒精1 ml 。 • 粪便:收集10g 粪便,用柱式离心的方法收集基因组DNA。 • 服务流程: • 检测流程:
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