- ¥590
- 钦诚生物
- QC101111
- 上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
室温
- 规格：
50次
本产品是专门用于从各种软体动物组织中提取基因组 DNA 的试剂盒。其原理是 基于阳离子去垢剂 CTAB 在适当的离子强度条件下，特异地跟基因组 DNA 结合形成 沉淀，然后在用硅胶膜技术进行进一步纯化。本产品具有下列特点： 1. 适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物动物，包括螺类、贝类、 乌贼、章鱼和蜗牛等。 2. 提取到的基因组 DNA 完整性，其中最长可以到达长度一般在 20-50kb。 3. DNA 纯净，OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50 Kb 左 右，可直接用于 PCR、酶切、杂交等。 4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
1. 匀浆方法一：称取 0.1-0.3g 软体动物组织，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉 后转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中。注意：最好避免使用含二氧化硅 的玻璃研钵，因为 DNA 会吸附在表面，影响得率。在离心管中加入 1 mL 溶液 A 并用移液枪头充分吹打混匀。进入第三步。
2. 匀浆方法二：将 0.1-0.3g 软体动物组织剪成小块，转移到 10-15mL 塑料管中 （培养细菌那种离心管即可），加入 1 mL，用 Polytron 式匀浆机（剪切式匀浆 机）匀浆 1 分钟左右。
3. 在样品中加入 20 uL 蛋白酶 K 溶液（20mg/mL），37℃保温 1-3 小时。注意： 最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让样品彻底溶化。
4. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自备氯仿，振荡器上振荡 30 秒充分混匀。
5. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟，小心将上清转移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。
6. 在上清液中加入等体积的溶液 C，上下颠倒 30 秒充分混匀。
7. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到 离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000rpm 室温 1 分钟，弃穿透液。再把 剩余的一半上柱，重复此操作。
8. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心半分钟， 弃穿透液。
9. 将 0.3 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 离心半分钟（此步 为第二次洗涤，一般可以省略）。
10. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
11. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 30uL DNA 洗脱液 3.0。 12. 12,000 rpm 离心 1 分钟，管底即为 DNA 溶液，可立即用于浓度测定或 PCR， 也可长期保存在-20℃。
1. 匀浆方法一：称取 0.1-0.3g 软体动物组织，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉 后转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中。注意：最好避免使用含二氧化硅 的玻璃研钵，因为 DNA 会吸附在表面，影响得率。在离心管中加入 1 mL 溶液 A 并用移液枪头充分吹打混匀。进入第三步。
2. 匀浆方法二：将 0.1-0.3g 软体动物组织剪成小块，转移到 10-15mL 塑料管中 （培养细菌那种离心管即可），加入 1 mL，用 Polytron 式匀浆机（剪切式匀浆 机）匀浆 1 分钟左右。
3. 在样品中加入 20 uL 蛋白酶 K 溶液（20mg/mL），37℃保温 1-3 小时。注意： 最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让样品彻底溶化。
4. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自备氯仿，振荡器上振荡 30 秒充分混匀。
5. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟，小心将上清转移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。
6. 在上清液中加入等体积的溶液 C，上下颠倒 30 秒充分混匀。
7. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到 离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000rpm 室温 1 分钟，弃穿透液。再把 剩余的一半上柱，重复此操作。
8. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心半分钟， 弃穿透液。
9. 将 0.3 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 离心半分钟（此步 为第二次洗涤，一般可以省略）。
10. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
11. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 30uL DNA 洗脱液 3.0。 12. 12,000 rpm 离心 1 分钟，管底即为 DNA 溶液，可立即用于浓度测定或 PCR， 也可长期保存在-20℃。
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技术资料暂无技术资料 索取技术资料
柱式软体动物DNAout
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