- ¥750
- 钦诚生物
- QC-160906
- 上海
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
4°保存
- 规格：
50次
本产品是在柱式植物RNAOUT（CAT#：71203）的基础上经过配方和流程优化得到的无氯仿升级产品，它结合了植物RNAout的高效性、快捷性以 及无氯仿处理的安全性。该产品特点如下：
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| 成 份 | 编 号 | 大纸盒包装 | |||
| 无酚无氯仿植物 RNA 提取溶液A | 160906a | 50 mL | |||
| 无酚无氯仿植物 RNA 提取溶液 B | 160906b | 50 mL | |||
| 离心吸附柱（宽口） | 60911 | 50 套 | |||
| 通用洗柱液 | 60408 | 50 mL | |||
| RNA 洗脱液 | 71207 | 10 mL | |||
| 使用手册 | 160906sc | 1 份 | |||
| 常温运输和保存，有效期一年。 | |||||
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注意：如果不小心将溶液 A 放置在 4℃，则可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
- 将匀浆物或液氮研磨物转移至干净的 1.5 mL 塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织（比如果实）含有大量水份，匀浆液会多于 1 mL，转移时也只取 1 mL。
- 室温 12000-15000 g 离心 3-5 分钟，管底沉淀为细胞破碎物。
- 将上清液(约 1 mL)转移到另一干净的 2 mL 塑料离心管中。
- 加入等体积的溶液 B，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生（对某些植物，属于正常现象），千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
- 将 0.7mL 的混合溶液转移到离心吸附柱中，14000-15000 g 室温离心 3 到 5 分钟，弃穿透液。如果离心吸附柱里面有残留液体没穿透，可以延长离心时间直到彻底穿透。
- 将剩下的混合溶液按每次 0.7mL 的方式转移到同一离心吸附柱中， 每次13000-15000 g 室温离心 3-5 分钟，弃穿透液。
- 由于混合液有 2mL 左右，所以三次转移即可将混合液全部挂柱。
- 加 0.7 mL 通用洗柱液，室温 13000-15000 g 离心半分钟，弃穿透液。如果离心吸附柱里面有残留液体没穿透，可以延长离心时间直到彻底穿透。
- 再加 0.3 mL 通用洗柱液，室温 13000-15000 g 离心半分钟，弃穿透液。
- 12000 rpm 室温离心 10 秒以便去除残留液体。此步很重要，否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。
- 将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中，加入 50-100 uL RNA 洗脱液，室温放置 1-2 分钟。
- 13000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
- RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子
- RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出RNA 浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
- RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之
| 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。 |
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无酚无氯仿柱式植物RNAout
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