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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 保质期:
一年
- 供应商:
钦诚生物
- 保存条件:
4°保存
- 规格:
50次
本产品是在柱式植物RNAOUT(CAT#:71203)的基础上经过配方和流程优化得到的无氯仿升级产品,它结合了植物RNAout的高效性、快捷性以 及无氯仿处理的安全性。该产品特点如下:
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| 成 份 | 编 号 | 大纸盒包装 | |||
| 无酚无氯仿植物 RNA 提取溶液A | 160906a | 50 mL | |||
| 无酚无氯仿植物 RNA 提取溶液 B | 160906b | 50 mL | |||
| 离心吸附柱(宽口) | 60911 | 50 套 | |||
| 通用洗柱液 | 60408 | 50 mL | |||
| RNA 洗脱液 | 71207 | 10 mL | |||
| 使用手册 | 160906sc | 1 份 | |||
| 常温运输和保存,有效期一年。 | |||||
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- 将匀浆物或液氮研磨物转移至干净的 1.5 mL 塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份,匀浆液会多于 1 mL,转移时也只取 1 mL。
- 室温 12000-15000 g 离心 3-5 分钟,管底沉淀为细胞破碎物。
- 将上清液(约 1 mL)转移到另一干净的 2 mL 塑料离心管中。
- 加入等体积的溶液 B,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物,属于正常现象),千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
- 将 0.7mL 的混合溶液转移到离心吸附柱中,14000-15000 g 室温离心 3 到 5 分钟,弃穿透液。如果离心吸附柱里面有残留液体没穿透,可以延长离心时间直到彻底穿透。
- 将剩下的混合溶液按每次 0.7mL 的方式转移到同一离心吸附柱中, 每次13000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,弃穿透液。
- 由于混合液有 2mL 左右,所以三次转移即可将混合液全部挂柱。
- 加 0.7 mL 通用洗柱液,室温 13000-15000 g 离心半分钟,弃穿透液。如果离心吸附柱里面有残留液体没穿透,可以延长离心时间直到彻底穿透。
- 再加 0.3 mL 通用洗柱液,室温 13000-15000 g 离心半分钟,弃穿透液。
- 12000 rpm 室温离心 10 秒以便去除残留液体。此步很重要,否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。
- 将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中,加入 50-100 uL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
- 13000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
- RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子
- RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出RNA 浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
- RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之
| 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。 |
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文献和实验C21 H22 O2 N2 ,是马钱子科植物马钱子种子中含的一种生物碱。不易溶于水、醚、冷酒精,易溶于氯仿。其水溶液特别苦。马钱子碱能作用于脑脊髓的所有部位,但主要作用点是脊髓。能提高脊髓的反射兴奋。只要轻微刺激,就可引起肌肉的收缩运动。这种运动失去协调性,扩展到全身,就会引起强直性痉挛。颉颃肌间的相互作用消失,出现后弓反张,呼吸运动障碍,最后因呼吸麻痹而死。对大脑皮质可提高感觉中枢的感受性。作为特异的颉颃药有唛酚生
一样,RNeasy Protect Kits采用QIAGEN著名的硅胶膜纯化柱技术,迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA,无需酚氯仿抽提,不用乙醇沉淀或LiCl沉淀,也不用CsCl超离,只要洗脱即可得到纯的RNA。通常情况下RNeasy的纯化技术足以除去绝大部分的DNA,而无需额外进行DNaes处理,但是对于一些对痕量DNA非常敏感的实验,用RNase-Free DNase Set(QIAGEN cat.no. 79254)可以直接在纯化柱上消化DNA残留,在随后的洗涤步骤中除去DNase,最后洗脱得到不含DNA
) 51304 QIAamp DNA Mini Kit(50) 51504 QIAamp DNA Stool Mini Kit(50) DNeasy System 是QIAGEN公司为除临床样本以外的其他样本,如动物组织、血液、酵母、细菌、植物等快速制备基因组DNA而设计的,采用硅胶膜技术,无需酚氯仿抽提和乙醇沉淀。单个离心柱或96孔纯化板满足不同的需求。 货号 品名(规格) 价格(RMB) 69504 DNeasy Tissue Kit(50) 69103 DNeasy
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