5′ AppDNA/RNA 热稳定连接酶

特别提示：包括5′ AppDNA/RNA 热稳定连接酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：5′ AppDNA/RNA 热稳定连接酶
产品货号：SV1378
产品规格：50次|10次

特性:
二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头
构建 small RNA 二代测序文库，可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA
概述
:5´ AppDNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲*杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是 RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP，但需要 5´ 预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 的 3´ OH 末端。该酶也可催化 3´ 端被 2´ -O- 甲基化的 RNA 和 5´ 预腺苷化接头的连接反应。连接反应的zuì适反应温度为 60-65℃。连接酶的点突变体不能使 RNA 或单链 DNA 的 5´ 端磷酸腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。
该酶能在 65℃ 反应，此温度下降低了 RNA 的二级结构，提高连接效率。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 5´ AppDNA/RNA 连接酶基因。
反应条件:
1X BalbBuffer 1
[10 mM Bis-Tris-Propane-HCl (pH 7.0 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，65℃ 温育。
质保声明:
无单链和双链 DNA 内切酶、外切酶、RNase 和磷酸酶污染。
浓度:
20 μM。
使用注意事项:
建议连接单链 DNA 和预腺苷酸化接头时，使用含镁离子的 BalbBuffer 1。

除了5′ AppDNA/RNA 热稳定连接酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：Therminator II DNA聚合酶
货号：BTN131196
规格：100U
Therminator II DNA聚合酶是9°Nm DNA聚合酶中的一种，但有较强的修饰底物掺入能力，如dNTP、rNTP和acyNTP。Therminator II DNA聚合酶是Therminator DNA聚合酶的衍生物，前者比后者多了一个氨基酸突变。这种改变提高了rNTP和3′功能基团经修饰核苷酸的掺入效率。

产品特点：
1．提高了修饰核苷酸特别是rNTP的掺入能力；
2．部分核糖核酸置换法测定DNA序列；
3．ddNTP或acyNTP的链终止法测序；
4．ddNTP或acyNTP链终止法测序用于SNP分析。

产品组成：

成份	规格
Therminator II DNA聚合酶(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指75℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

名称：BccI限制性内切酶
货号：SV0108
规格：5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

名称：BstXI限制性内切酶
货号：SV0266
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
特性
重组酶、省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dcm甲基化敏感。
注意事项
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

名称：HpaII限制性内切酶
货号：SV0422
规格：10KU|10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
Hpall是Mspl的完全同裂酶。
当 KCl 浓度＞50mM 时，酶活性被抑制。

名称：SbfI-HF限制性内切酶
货号：SV0677
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 25%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：PI-PspI归位内切酶
货号：SV0813
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 10%
特性:
重组酶。
反应条件:
Pl-Pspl 反应缓冲液+ BSA，65℃。
浓度:
5,000units/ml。
37℃ 时活性:
5%。
注意事项:
归位内切酶没有严格定义的识别序列。

名称：T7 DNA 连接酶
货号：SV1028
规格：750KU|100KU
特性:
仅用于连接粘性末端
dsDNA 切刻修复
概述:
T7 DNA 连接酶来源于 T7 噬菌体，它是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶，该酶可催化双链 DNA 相邻 5´ 磷酸末端和 3´ 羟基基团之间形成磷酸二酯键。T7 DNA 连接酶可以有效地催化粘性末端和切刻的连接。与 T4 和 T3 DNA 连接酶不同，T7 DNA 连接酶不能有效地催化平末端连接。因此，在实验过程中，当平末端和粘性末端同时存在时，仅需粘性末端发生连接，T7 DNA 连接酶是理想的选择。
来源:
重组 E. coli 质粒，含有 T7 DNA 连接酶编码基因。
反应条件:
1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl，1 mM ATP，10 mM MgCl2，1 mM DTT，7.5% PEG 6000 (pH 7.6 @ 25℃)]，25℃ 温育。
质保声明:
T7 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测，以确保zuì高的纯度和反应效率。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位是指在 20 μl 总反应体系中，1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 30 分钟，能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 片段连接所需的酶量。
浓度:
3,000,000 units/ml。
注意事项:
ATP 是必需的辅助因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时，可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液，但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。
65℃ 加热 10 分钟可使 T7 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG，该酶不能加热失活，否则会抑制后续转化实验。

名称：T4 DNA连接酶
货号：MT0054
规格： 35KU|3500KU
T4 DNA 连接酶可催化相邻DNA 链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需ATP作辅酶，不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接，也可以催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。可应用于在粘性末端或平末端连接双链DNA分子，也可应用于修补双链DNA、RNA或DNA RNA杂交体上的缺口。

产品组成：

组分	35KU	3500KU
T4 DNA Ligase(350 U/μl)	100μl	1ml×10
10×Ligation Buffer	250μl	20ml

储存条件：20℃可保存1年，-80℃可保存3年，避免反复冻融。

活性定义：在20μl连接反应体系、0.12μM（300μg/ml）的5’-末端浓度条件下，16℃反应30分钟，能使50％HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个活性单位。